[發明專利]一株梨樹枝條降解真菌及其菌劑

有效

• 申請號: 201410228275.0
• 申請日: 2014-05-27
• 公開（公告）號: CN103992957A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發明（設計）人: 徐陽春;張乃文;韋中;沈其榮
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C05F17/00;C05F11/08;C12R1/645
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;邢賢冬

技術領域

本發明屬于農業集約化生產技術，涉及一株梨樹枝條降解真菌及其菌劑，專用于降解廢棄梨樹枝條生產有機肥料，實現有機廢棄物資源化利用。

背景技術

修剪是一項梨樹栽培和管理的重要技術措施，適量的修剪對果樹的生長和果實的產量品質都有積極的影響。處于盛果期的梨園，修剪枝條量一般在1500-2250kg·hm^-2。農業部市場與經濟信息司統計的數據表明，2011年我國梨樹的栽培面積為110萬多公頃，據這個數字推算，我國梨園每年枝條的修剪數量可達161-242萬噸。枝條中含有豐富的纖維素、木質素、蛋白質、糖類和脂肪等有機物，以及各種大中微量無機養分，是寶貴的農業資源，因此，梨樹枝條資源的開發和利用有著非常廣闊的前景。然而，梨樹枝條中含有大量的木質素和纖維素，因此不易腐爛，不能就地進行還田處理。除了部分枝條應用于食用菌的栽培以外，絕大部分梨樹枝條都被隨意堆放在路邊或就地焚燒，焚燒會造成嚴重的大氣污染，堆放會誘發田間的病蟲害，同時也造成了寶貴資源的浪費。

研究表明，修剪枝條等園林廢棄物，作為堆肥物料的調理劑，對堆肥物料的含水率、孔隙度和碳氮比等有良好的調節作用。隨著果樹修剪枝條資源規模的不斷擴大和再利用難度的困擾，將果樹修剪枝條作為主要堆肥材料進行堆肥技術化的研究逐步增加。通過聯合堆肥化實驗的結果顯示，枝條堆肥養分豐富全面，病菌數量達到無害化，是一種成熟穩定和富含營養的優質有機肥和土壤改良劑。可見將梨樹枝條進行固體有機廢棄物資源化(堆肥)是解決梨樹枝條再利用問題的簡單有效途徑。

然而在堆肥過程中，纖維素、半纖維素和木質素等大分子的分解是限制堆肥腐熟的主要因素，白腐真菌是目前報道對木質素降解效果最強的一類真菌。在堆肥中接種木質素降解真菌，可以利用真菌菌絲對木材的機械穿透作用和降解真菌分泌的降解酶類，加快堆肥底物中木質素的分解，從而縮短堆肥腐熟的周期。若能篩選到相應的高效降解功能菌株，并將其用于梨樹修剪枝條堆肥生產，具有良好的應用前景和實用價值。

發明內容

1.技術問題

本發明的目的在于篩選一種能夠高效分解梨樹枝條木質素的真菌，通過其對木質素的高效降解效果，達到加速梨樹枝條堆肥腐熟的目的，從而使梨樹修剪枝條能夠通過堆肥化得以大規模的資源化再利用，確保可持續農業的順利發展。

2.技術方案

一株能降解梨樹枝條的真菌D10，該菌株屬于撕裂蠟孔菌(Ceriporia?lacerata)，2013年7月8日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(北京市朝陽區北辰西路1號院3號)，菌種保藏號為CGMCC?NO.7852。其生物學特性為，在PDA平板上，10天后長滿平板，菌落呈白色絨毛狀，菌絲生長蓬松，速度慢，多為氣生菌絲，菌絲在顯微鏡下觀察無隔，有旱螺旋狀扭結。菌絲直徑4.1-5.5μm。

梨樹枝條降解真菌D10在PDA-愈創木酚培養基上產生紅棕色氧化圈；在PDA-苯胺藍培養基上產生褪色圈。PDA-愈創木酚培養基為：PDA培養基中加入1g·L^-1愈創木酚。PDA-苯胺藍培養基為：PDA培養基中加入0.1g·L^-1苯胺藍。PDA培養基為：土豆200.0g，蔗糖20.0g，瓊脂18.00g，水1000mL。

本發明所述的用于降解梨樹枝條的真菌在梨樹修剪枝條降解方面的應用。

一種含有所述的梨樹枝條降解真菌D10的真菌菌劑，其制備方法為：將上述菌株D10接種至梨樹枝條粉末培養基上，25～35℃條件下靜止培養6～8天，加無菌水震蕩，過濾培養物后得到孢子懸液菌劑，調節孢子懸液菌劑中孢子數不少于10⁴個/mL得到真菌菌劑；

所述的梨樹枝條粉末培養基的配制方法為：梨樹枝條粉末中添加等質量的無機營養液，至濕潤狀態，在121℃高壓滅菌20min。

所述的無機營養液為：NH₄Cl2.0g，MgSO₄·7H₂O0.5g，KH₂PO₄1.0g，Na₂HPO₄0.2g，MnSO₄0.0035g，CuSO₄·5H₂O0.007g，FeSO₄·7H₂O0.007g，ZnSO₄0.002g，CoCl₂，0.003g，水1000mL，pH自然。