[發(fā)明專利]松茸菌絲的培養(yǎng)方法及其專用裝置

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410227831.2
• 申請日: 2014-05-27
• 公開（公告）號: CN104025904B
• 公開（公告）日: 2016-10-26
• 發(fā)明（設計）人: 樸春根;李永;郭民偉;薛寒;田國忠;汪來發(fā);王曦茁;林彩麗
• 申請（專利權）人: 中國林業(yè)科學研究院森林生態(tài)環(huán)境與保護研究所
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 北京思元知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11598
• 代理人: 余光軍

技術領域

本發(fā)明涉及一種真菌的培養(yǎng)方法以及實現(xiàn)該方法的專用裝置，尤其涉及松茸菌絲的培養(yǎng)方法及其專用裝置，屬于松茸菌絲的人工培養(yǎng)領域。?

背景技術

松茸是珍貴的林下野生真菌，被正式列入了國家二級保護植物名錄。松茸是一種與松樹形成營養(yǎng)共生關系的外生菌根菌，必須依靠活體樹木的根系來維持生長；由于松茸對生長條件的要求十分苛刻，目前尚不能人工栽培。由于森林生態(tài)環(huán)境的破壞和無序的惡性采集，其生長的生物圈日趨縮小，資源日益匱乏；因而松茸人工促繁和功能性物質深度利用的需求愈來愈大，而其基礎就是松茸菌絲的大量快速培養(yǎng)技術。?

目前，松茸菌絲的培養(yǎng)所采用的培養(yǎng)器均為三角瓶或圓柱形狀，均存在分離難、生長緩慢、規(guī)模小且收率低等問題，如500ml三角瓶液體培養(yǎng)收率僅為4g/L左右，盡管有收率20g/L左右的報道但其培養(yǎng)量僅為100ml規(guī)模或培養(yǎng)時間長達1個月以上。松茸菌絲的人工培養(yǎng)中所普遍存在的規(guī)模小、周期長和收率低等問題嚴重制約了松茸野外人工促繁技術和功能性物質深度開發(fā)利用研究的開展，亟待改進。?

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的之一是提供一種培養(yǎng)規(guī)模大、周期短、松茸菌絲的收率高的松茸菌絲專用培養(yǎng)裝置。?

本發(fā)明的目的之二是將將所述的專用裝置應用于培養(yǎng)松茸菌絲。?

本發(fā)明的上述目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的：?

一種松茸菌絲的專用培養(yǎng)罐，包括：罐體、罐蓋、攪拌棒、攪拌葉、?出氣口、接種口(或補料口)、取樣口、入氣口；其中，罐蓋、出氣口以及接種口(或補料口)設置在罐體的上端；攪拌棒和攪拌葉位于罐體的內腔中心；取樣口設置在罐體的下端；在取樣口中設置有控制閥，在入氣口中設置有控制閥；其中，罐體的上部及中部的體積顯著大于罐體下部的體積且罐體中部的體積最大。?

為了達到最佳的技術效果，優(yōu)選的，罐體的上部和中部呈球型，罐體的下部呈緩坡型罐脖，整個罐體呈氣球形。?

目前松茸菌絲的培養(yǎng)罐均為三角瓶或圓柱形狀，用三角瓶或圓柱形狀的培養(yǎng)罐培養(yǎng)松茸菌絲，均存在收率低、培養(yǎng)規(guī)模小、培養(yǎng)周期長等問題；本發(fā)明通過大量的實驗發(fā)現(xiàn)，采用中、上部體積大，下部體積緩坡型縮小的氣球形培養(yǎng)罐能有效增加單位容積培養(yǎng)液的空氣接觸面積，提高培養(yǎng)液的氧氣溶量，減少氣泡破裂給細胞所帶來的脅迫，加大培養(yǎng)液的整體循環(huán)，促使菌絲培養(yǎng)均勻，最終顯著提高松茸菌絲的培養(yǎng)效率。經(jīng)試驗證實，相比現(xiàn)有的圓柱形或三角形等其它形狀的培養(yǎng)罐體，氣球形罐體能顯著提高松茸菌絲的培養(yǎng)效率。?

本發(fā)明進一步發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)過程中，氧氣供應采用鼓泡式入氣(即：從培養(yǎng)罐底部供氣)的供應方式能夠確保氧氣的充足供應及氧氣的分布均勻，能夠有效提高松茸菌絲的培養(yǎng)效率；因此，本發(fā)明優(yōu)選將入氣口設置在培養(yǎng)罐的最底部，實現(xiàn)從培養(yǎng)罐底部供氣氧氣。此外，在入氣口內設置一個入氣口控制閥，能夠確保培養(yǎng)(供氣)前和培養(yǎng)(供氣)結束后，避免罐體內培養(yǎng)液滴漏以及被污染等情況。?

從培養(yǎng)罐底部供應氧氣時，入氣口附近的菌絲附著生長并成團常會造成入氣通道不暢通或堵塞，最終導致菌絲培養(yǎng)效率低下；為了解決上述問題，本發(fā)明在靠接入氣口的上方設置兩個外部循環(huán)接口，兩個外部循環(huán)接口用軟管連接，在入氣口附近形成培養(yǎng)液的流體循環(huán)，防止入氣口附近菌絲附著生長并成團所引起的入氣通道的堵塞，保證培養(yǎng)平穩(wěn)及高效率。?

設置在培養(yǎng)罐罐體下部的取樣口便于實時分析碳氮等營養(yǎng)源、pH值和代謝產(chǎn)物成分變化；其中，設置在取樣口中的控制閥能夠保證非取樣時段罐體內培養(yǎng)液的滴漏和污染。?

設置在培養(yǎng)罐罐體上部的出氣口能夠保證恒壓并避免異常罐壓所帶來的培養(yǎng)效率的降低。?

位于培養(yǎng)罐罐體的內腔中的攪拌棒和攪拌葉能夠防止氣泡產(chǎn)生、有害成分形成和菌絲成團所帶來的培養(yǎng)效率的降低。?

本發(fā)明還提供了一種應用所述的專用培養(yǎng)罐培養(yǎng)松茸菌絲的方法，該方法包括：?

1、將松茸菌絲的培養(yǎng)基注入到罐體中，培養(yǎng)基的體積不超過罐體體積的80％；?

2、將松茸菌種通過接種口或補料口接種到罐體的培養(yǎng)基中，開啟攪拌棒，進行松茸菌絲的培養(yǎng)；?

3、開啟入氣口中設置的控制閥，通過罐體的底部向培養(yǎng)基供應氧氣；?

4、適時開啟出氣口，排除罐體內的過多的氣體，保證罐體內的恒壓；?

5、通過取樣口從培養(yǎng)罐內取出樣品進行分析；通過接種口(或補料口)適時向罐體內補充營養(yǎng)成分。?

本發(fā)明還提供了另外一種應用所述的專用培養(yǎng)罐培養(yǎng)松茸菌絲的方法，該方法包括：?

1、將松茸菌絲的培養(yǎng)基注入到罐體中，培養(yǎng)基的體積不超過罐體體積的80％；?