[發明專利]人DEFB1的用途

有效

• 申請號: 201410225329.8
• 申請日: 2014-05-26
• 公開（公告）號: CN104225576B
• 公開（公告）日: 2017-11-07
• 發明（設計）人: 刁瑞英;牟麗莎;黃衛人;蔡學泳;蔡志明
• 申請（專利權）人: 深圳市第二人民醫院
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;C07K14/47;A61P15/08
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司44281
• 代理人: 向武橋,彭家恩

技術領域

本申請涉及一種人DEFB1的用途。

背景技術

在世界范圍內，不育癥影響～10-15％夫婦，其中，男性不育大約占50％。造成男性不育癥的原因有很多種，其中，精子功能缺陷是最主要最常見的原因。精子活力低下即弱精子癥，是男性不育常見的原因，約占生育低下或不育癥的18％，被認為是影響正常精卵受孕的最重要因素之一。男性生殖道感染是另一個與不育癥相關的病因，常見病理類型是睪丸炎或附睪炎，約占男性不育癥的11％。其中，精液中白細胞數目增多，又稱精液白細胞增多癥，影響約5-10％的男性，是男性生殖道感染的診斷指標。有趣的是，弱精子癥患者精液中常常同時伴隨著感染或白細胞數目增多。但是，目前有關弱精子癥和精液白細胞增多癥的發病機理及相關性仍不清楚。

20世紀50年代以前，人們從多核白細胞的粗提蛋白中發現了具有抗菌活性的“吞噬素”，自此拉開了研究炎癥白細胞抗菌肽的序幕。20世紀60年代初，伴隨蛋白鑒定和純化技術的發展，溶菌酶被發現對革蘭陽性菌具有溶菌活性。20世紀80年代初，人們分別從兔子和人的肺部巨噬細胞中純化出一種富含半胱氨酸的抗菌蛋白，并將其命名為“防御素”。防御素是含有29-42個氨基酸陽離子多肽，包括六個保守半胱氨酸。這些半胱氨酸共同形成三個分子內二硫鍵，并折疊成抗蛋白酶剪切的活性形式。根據基因和多肽結構的不同，防御素分為兩個亞家族：α-和β-防御素。其中，α-防御素的六個半胱氨酸的偶聯方式是1–6、2–4和3–5，而β-防御素的偶聯方式是1–5、2–4和3–6。因為半胱氨酸5和6總是相鄰的，因此兩個亞家族的結構很相似。單倍體α-和β-defensins的三維結構骨架是defensin樣折疊，即由三個二硫鍵構成的三個反向平行的β-sheets組成。人α-防御素的標準序列是x1–2CXCRx2–3Cx3Ex3GxCx3Gx5CCx1–4，其中，x代表任一氨基酸殘基，首先從中性粒嗜天青顆粒細胞中分離。人β-防御素的標準序列是x2–10Cx5–6(G/A)xCX3–4Cx9–13Cx4–7CCxn。人β-防御素-1(DEFB1)首先從人血清中分離。

人類約含有40多種β-防御素，主要定位于呼吸道、消化道和生殖道粘膜上皮細胞。有趣的是，50％的β-防御素mRNAs位于附睪。β-防御素在粘膜上皮中表達，受多種刺激因素包括微生物、前炎癥細胞因子和雄激素的誘導調控。防御素的功能包括：1)對細菌、真菌和某些病毒發揮廣譜殺傷作用，機制是利用其本身的極性拓撲結構，插入感染微生物細胞膜的脂質雙層中，打孔并破壞細胞膜；2)免疫增強、趨化和調控作用，如通過與免疫細胞表面的化學因子受體CCR6介導對免疫細胞(吞噬細胞和肥大細胞)具有化學趨化效應；3)對生殖系統的作用。

目前，已在人及小鼠附睪內發現了多種附睪特異的β-防御素家族成員，提示這種分泌型防御素多肽可能在精子成熟過程中參與附睪內各段特定微環境的功能維護。最近文獻報道，附睪分泌的小分子分泌型多肽蛋白家族即β-防御素家族成員，具有殺菌活性，可能參與精子在附睪內的成熟過程。如附睪特異性β-防御素22通過其發夾結合能力決定精子受精能力，而β-防御素15對精子活力及受精能力是必須的。本申請人曾公開報道，一種大鼠附睪特異表達β-防御素多肽即Bin-1b，參與精子活力的啟動；而干擾大鼠精子中Bin1b的功能，將導致其活力低下及受精能力下降。最近也有報道稱，一種附睪特異性β-防御素即β-防御素126的基因發生突變，將影響其與瘦素的結合能力和穿卵母細胞的能力。綜上，β-防御素家族成員不僅參與宿主自身防御機制，也參與調控精子功能，對男性生育是非常重要的。盡管目前大部分研究集中在附睪特異性β-防御素，但是廣譜表達在上皮組組織內的其他β-防御素成員，目前較少關于其對精子功能和受精能力的調控報道。

作為第一個被鑒定的β-defensin家族的成員，人β-防御素1(DEFB1)，廣泛分布在機體各種上皮細胞上，具有抗病毒、細菌和真菌的殺菌能力。最近研究報道，DEFB1不僅在男性生殖道上皮上表達，也在精漿和射出的精子上有表達，提示男性生殖道上皮分泌的DEFB1能夠結合到精子表面。雖然，人DEFB1在大鼠的同源異構體Binb已被廣泛研究，并被證明參與精子內Ca²⁺動員劑精子活力啟動但是，目前較少關于人DEFB1調控精子功能和調節男性生育能力的研究報道。

發明內容

本發明提供一種新的人DEFB1的用途。

本發明提供一種人DEFB1在制備男性不育癥診斷和治療制劑中的應用。

DEFB1基因在NCBI數據庫中的編號是1672。