[發明專利]一種靈芝皇制劑HPLC標準指紋圖譜及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 201410222356.X
• 申請日: 2014-05-23
• 公開（公告）號: CN104007198A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發明（設計）人: 高新開;程敏;譚麗容;吳小莉
• 申請（專利權）人: 無限極（中國）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 鄭瑩

1.一種靈芝皇制劑HPLC標準指紋圖譜，其特征在于：該指紋圖譜中有40個共有特征峰，分別編號為1至40，以編號16特征峰為參照峰，編號為1至40的特征峰相對保留時間依次分別為：0.095~0.099?min、0.109~0.113?min、0.121~0.125?min、0.165~0.169?min、0.199~0.205?min、0.245~0.247?min、0.368~0.372?min、0.387~0.393?min、0.434~0.438?min、0.549~0.551?min、0.603~0.605?min、0.873~0.875?min、0.889~0.891?min、0.897~0.899?min、0.915~0.917?min、1.000?min、1.065~1.067?min、1.121~1.123?min、1.155~1.157?min、1.181~1.183?min、1.361~1.363?min、1.395~1.397?min、1.447~1.449?min、1.458~1.460?min、1.489~1.493?min、1.507~1.511?min、1.576~?1.580?min、1.612~?1.615?min、1.629~1.633?min、1.682~1.686?min、1.696~1.700?min、1.706~1.710?min、1.764~1.768?min、1.803~1.805?min、1.835~1.839?min、1.853~1.857?min、1.866~1.868?min、1.876~1.878?min、1.886~1.890?min、1.930~1.932?min。

2.根據權利要求1所述的一種靈芝皇制劑HPLC標準指紋圖譜，其特征在于：所述的編號分別為1至40的40個共有特征峰中：

歸屬于靈芝的特征峰編號為1、2、3、21、22、23、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、37、38、40一共20個，其中31號峰為靈芝酸A；

歸屬于菟絲子的特征峰編號為9、10、14、15、16一共5個，其中14號峰為金絲桃苷、15號峰為異槲皮苷、16號峰為紫云英苷；

歸屬于甘草的特征峰編號為12、13、18、19、36一共5個，其中12號峰為甘草苷、36號峰為甘草酸；

歸屬于黃精的共有峰編號為4、5、6一共3個；

歸屬于白術的特征峰編號為10、17、24一共3個；

歸屬于五味子的特征峰編號為39一共1個，39號峰為五味子醇甲；

歸屬于枸杞子的特征峰編號為9、11一共2個。

3.根據權利要求1或2所述的一種靈芝皇制劑HPLC標準指紋圖譜，其特征在于：所述的靈芝皇制劑由靈芝、白術、黃精、枸杞子、茯苓、麥冬、菟絲子、五味子、薏苡仁、甘草10味藥材制成。

4.權利要求1～3中任一所述一種靈芝皇制劑HPLC標準指紋圖譜的構建方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）制備靈芝皇制劑供試品溶液；

2）制備對照品溶液：精密稱取靈芝酸A、甘草苷、甘草酸銨、金絲桃苷、異槲皮苷、紫云英苷、五味子醇甲，加甲醇溶解，分別制成濃度已知的對照品溶液；?

3）靈芝皇制劑的HPLC指紋圖譜的建立：分別吸取對照品溶液和供試品溶液，進樣，用高效液相色譜儀測定，線性梯度洗脫程序如下表：?

以編號16特征峰為參照峰的保留時間為1，計算得出供試品各特征峰的相對保留時間；??

4）靈芝皇制劑HPLC?的標準指紋圖譜：測定至少10?批靈芝皇制劑樣品供試品溶液的指紋圖譜，由各指紋圖譜中共有特征峰構成的指紋圖譜為靈芝皇制劑HPLC?的標準指紋圖譜。

5.根據權利要求4所述的一種靈芝皇制劑HPLC標準指紋圖譜的構建方法，其特征在于：步驟1）中制備靈芝皇制劑供試品溶液的具體操作為：精密稱取靈芝皇膠囊內容物，置于帶塞的錐形瓶中，加入甲醇，使靈芝皇制劑的濃度為0.25~1.0g/mL，密塞，稱定重量，超聲處理40~60min，靜置放冷，再稱定重量，用甲醇彌補減失的重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液，置蒸發皿中蒸干，殘渣用甲醇溶解，并用1～2?mL容量瓶定容，搖勻，濾過，取續濾液，即可。