[發(fā)明專利]乙醇注入-動態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410219656.2
• 申請日: 2014-05-23
• 公開（公告）號: CN104012991A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉偉;彭盛峰;鄒立強(qiáng);劉成梅
• 申請（專利權(quán)）人: 南昌大學(xué)
• 主分類號: A23L1/30
• 分類號: A23L1/30;A23P1/04
• 代理公司: 南昌市平凡知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 36122
• 代理人: 夏材祥

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及涉及水溶性藥物納米脂質(zhì)體的制備方法，具體涉及一種乙醇注入-動態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法。

背景技術(shù)

丁香酚具有消炎、止痛、抗氧化、抑菌等功能，是保健食品、藥品等的潛在使用對象，但它較差的水溶性限制了其在食品中的應(yīng)用。脂質(zhì)體（liposome)是由磷脂雙分子層形成的內(nèi)部包含水相的封閉囊泡。研究表明，脂質(zhì)體具有緩釋性、細(xì)胞親和性、組織相容性和靶向性等優(yōu)點，已成功應(yīng)用于生物醫(yī)藥、化工農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。脂質(zhì)體用于包裹營養(yǎng)素、酶、食品添加劑、食品抗菌劑等食品運載體系顯示出誘人前景。利用脂質(zhì)體技術(shù)將丁香酚包封起來，可以克服丁香酚上述缺點。乙醇注入-動態(tài)高壓微射流法制備的脂質(zhì)體可以克服粗脂質(zhì)體粒徑大，不穩(wěn)定等缺點，同時乙醇注入法突破了薄膜法洗膜難和小批量生產(chǎn)的障礙。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為優(yōu)化丁香酚脂質(zhì)體的制備工藝，提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，評價丁香酚脂質(zhì)體的抗菌活性、儲藏穩(wěn)定性等，為丁香酚脂質(zhì)體的開發(fā)提供一種乙醇注入-動態(tài)高壓微射流制備丁香酚納米脂質(zhì)體的方法。

本發(fā)明所述方法包括：

（1）丁香酚納米脂質(zhì)體的組分丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80、pH=7.4濃度為?0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液與無水乙醇的質(zhì)量體積比為：在100mL?pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液中：丁香酚?0.38-1.16g、卵磷脂?2.32-6.99g、膽固醇?0.35-1.04g、吐溫-80?0.52-1.55g、?無水乙醇?25-35mL；

（2）按上述重量百分比分別稱取丁香酚、卵磷脂、膽固醇和吐溫-80，在40-50℃條件下，溶于無水乙醇；

（3）將步驟（2）中所得溶液緩慢注入到pH=7.4濃度為0.05M/L的磷酸鹽緩沖溶液中，在攪拌的條件下將形成乳液；

（4）將步驟（3）中所得乳液移入圓底瓶，置于真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在50℃水浴條件下除去乙醇，用磷酸鹽緩沖溶液定溶，得到丁香酚粗脂質(zhì)體；

（5）用動態(tài)高壓微射流處理步驟（4）得到的粗脂質(zhì)體，壓力為120MPa，處理1次，即得丁香酚納米脂質(zhì)體。

?

本發(fā)明的有益效果是：

（1）包封率：乙醇注入-動態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體的具有比較高的包封率，包封率達(dá)到59.2%±4.7。

（2）粒徑：乙醇注入-動態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體的平均粒徑為58.6±3.4nm，分布系數(shù)為0.381±0.053。

（3）微觀形貌圖：乙醇注入-動態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體，其透射電鏡圖如圖2所示，脂質(zhì)體成球形，大小及分布都比較均勻。

（4）乙醇注入-動態(tài)高壓微射流法制備的丁香酚納米脂質(zhì)體具有緩釋性，24h后有76.6%的丁香酚釋放出來，其釋放曲線如圖3所示。

（5）儲藏穩(wěn)定性：分別將制備好的丁香酚納米脂質(zhì)體與丁香酚微乳（將丁香酚和吐溫-80溶于PBS溶液中，持續(xù)攪拌）置于4℃和室溫環(huán)境中，每隔一周測其粒徑分布及包封率。如圖4所示，丁香酚微乳有明顯的油狀沉淀，而丁香酚納米脂質(zhì)體則較為穩(wěn)定。而圖5所展示的平均粒徑及包封率變化也證明丁香酚納米脂質(zhì)體在儲藏期間較為穩(wěn)定。

附圖說明

圖1?為乙醇注入-動態(tài)高壓微射流法制備丁香酚納米脂質(zhì)體的工藝路線圖；

圖2為丁香酚納米脂質(zhì)體透射電鏡圖；

圖3為丁香酚納米脂質(zhì)體及丁香酚微乳的體外釋放曲線；

圖4為丁香酚納米脂質(zhì)體及丁香酚微乳在4℃及室溫環(huán)境中穩(wěn)定性觀察圖；

圖5為丁香酚納米脂質(zhì)體及丁香酚微乳在4℃及室溫環(huán)境中粒徑及包封率隨時間的變化。

具體實施方式

實施例1

稱取48.5g卵磷脂、6.6g膽固醇、12.2g吐溫-80和8.2g丁香酚，完全溶解于0.32L無水乙醇中，將乙醇溶液緩慢注入到1?L?pH7.4、濃度為0.05M的磷酸鹽緩沖溶液中，形成乳液，然后將其轉(zhuǎn)移到到圓底瓶中，在50℃水浴條件下真空旋轉(zhuǎn)除去無水乙醇，形成均勻的懸濁液即為粗脂質(zhì)體，形成的均勻懸濁液即為粗脂質(zhì)體。將粗脂質(zhì)體加入到動態(tài)高壓微射流（DHPM）中，于120MPa條件下微流化處理1次，即制備得到丁香酚納米脂質(zhì)體。制得的納米脂質(zhì)體為較透明乳白色溶液。制得的丁香酚納米脂質(zhì)體的包封率為60.1%，平均粒徑為60.4nm?，分布系數(shù)為0..332，在體外釋放試驗中，經(jīng)24h釋放后有78%的丁香酚釋放出來。

實施例2