[發明專利]一種抗氧化的牛冷凍精液稀釋液及制作方法

無效

• 申請號: 201410218772.2
• 申請日: 2014-05-23
• 公開（公告）號: CN104012520A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發明（設計）人: 白元生;張拴林;楊子森;劉曉妮;師周戈;趙宇瓊
• 申請（專利權）人: 山西省生態畜牧產業管理站
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 太原華弈知識產權代理事務所 14108
• 代理人: 李毅

技術領域

本發明屬于動物冷凍精液生產技術，具體涉及到一種添加微量元素硒和維生素E的冷凍精稀釋液的制作方法。

背景技術

牛的繁殖是養牛生產過程中的一個重要環節，牛群數量的增加、質量的提高都必須通過繁殖這一過程來實現。人工授精與胚胎移植技術是養牛業生產中兩次重大技術革命，能夠充分發揮優秀種公牛和母牛的繁殖潛力，顯示出很好的應用前景。人工授精與胚胎移植技術應用的前提是牛精液的保存技術的應用。精液冷凍保存的成功是人工授精技術上的一項重大革新，它不但解決了精液長期保存的問題，使精液的應用不受時間、地域和種畜生命的限制，而且提高優良公畜的利用率，加快品種的育成和改良的步伐。牛作為畜牧業生產中自然繁殖率最低的主要畜種之一，應用人工授精與胚胎移植技術提高牛繁殖力的意義更加重大。???????????

種公牛精液在冷凍保存時，精清對精子的保護能力是有限的，因此，進行精液的冷凍保存就要配合使用稀釋液，來最大程度的保護精子，因而稀釋液在精液冷凍保存中突顯其重要性，成為保證精液品質的主要因素。人工授精已是一門成熟的技術，但使用冷凍精液進行人工授精時，其受精效果比使用新鮮精液的效果較低，其原因在于新鮮精液在制作冷凍精液時，在其冷凍和解凍時精子的質量變化，是影響人工授精成功的重要因素。

現有的冷凍精液稀釋液通常是加入稀釋劑、營養劑、抗菌、抗凍、防休克和緩沖保護劑等，而對精液在冷凍和解凍過程中的能抗氧化損傷的物質，則局限在維生素E、維生素C和谷胱甘肽等物質上，由于抗氧化損傷能力不足，降低了解凍后的活率、生存率和頂體完整率等，降低了精液質量。

發明內容

本發明是針對現有冷凍精液稀釋液的抗氧化能力不足的現狀，提供一種抗氧化的牛冷凍精液稀釋液，它是在冷凍精液稀釋液常用的組成成分的基礎上，添加了一定濃度的微量元素硒和維生素E，提高了冷凍精液稀釋液的抗氧化能力，提高了精子活力與頂體完整率，延長了精子生存時間，提高了冷凍精液質量的目的。本發明的另一目的是提供抗氧化的牛冷凍精液稀釋液的制作方法。

本發明是通過以下技術方案實現的。

本發明的抗氧化的牛冷凍精液稀釋液，包括下列質量份的原料組成：?三羥甲基氨基甲烷20~26，檸檬酸三鈉10~15，果糖7~15，蒸餾水700~800，新鮮卵黃230~260，亞硒酸鈉0.125~0.375，維生素E2~32，甘油90-95，注射用青霉素鉀（規格為160萬單位/g）1~2、注射用硫酸鏈霉素（規格為100萬單位/g）1~2。

本發明的抗氧化的牛冷凍精液稀釋液制備方法，包括如下步驟：

（1）制備基礎緩沖液?稱取20~26份三羥甲基氨基甲烷、10~15份檸檬酸三鈉、7~15份果糖混合均勻后，加入700~800份蒸餾水中攪拌均勻，備用：

（2）制備基礎稀釋液?稱取230~260份新鮮卵黃與?(1)制備的基礎緩沖液均勻混合，再加入1~2份的注射用青霉素鉀（規格為160萬單位/g）和1~2份注射用硫酸鏈霉素（規格為100萬單位/g），攪拌均勻，備用；

（3）制備精液稀釋液??稱取0.125~0.375份的亞硒酸鈉、2~32份的維生素E加入(2)制備好的基礎稀釋液中，攪拌均勻后再稱取90-95份甘油加入基礎稀釋液，混合均勻，備用；

（4）將(3)制備好的精液稀釋液移至4℃條件下平衡5-20min，制得抗氧化的牛冷凍精液稀釋液。

本發明的抗氧化的牛冷凍精液稀釋液，優選下列質量份的原料組成：三羥甲基氨基甲烷22-24份，檸檬酸三鈉12-13份，果糖10-12份，蒸餾水750-780份，新鮮卵黃240-250份，亞硒酸鈉0.25-0.3份，維生素E20-25份，甘油92-94份，注射用青霉素鉀（規格為160萬單位/g）1.5-2份、注射用硫酸鏈霉素（規格為100萬單位/g）1-1.5份。

本發明的抗氧化的牛冷凍精液稀釋液制備方法，包括如下步驟：

（1）制備基礎緩沖液?取22~24份三羥甲基氨基甲烷、12~13份檸檬酸三鈉、10~12份果糖混合均勻后，加入750~780份蒸餾水中攪拌均勻，備用：

（2）制備基礎稀釋液?取240~250份新鮮卵黃與?(1)制備的基礎緩沖液均勻混合，再加入1.5~2份的注射用青霉素鉀（規格為160萬單位/g）和1~1.5份注射用硫酸鏈霉素（規格為100萬單位/g），攪拌均勻，備用；