[發明專利]一種利用比色法測定葡萄糖濃度的方法

無效

• 申請號: 201410215481.8
• 申請日: 2014-05-22
• 公開（公告）號: CN103954618A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 葉偉榮;陳心宇
• 申請（專利權）人: 葉偉榮
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用比色法測定葡萄糖濃度的方法，其包括以下步驟：

采用葡萄糖氧化酶催化樣品中的葡萄糖，使之釋放出過氧化氫；同時向樣品中添加辣根過氧化物酶與金納米棒，辣根過氧化物酶催化過氧化氫對金納米棒的蝕刻，待金納米棒的顏色穩定后，采用比色法確定樣品中葡萄糖濃度。

2.根據權利要求1所述的測定葡萄糖濃度的方法，其特征在于：還包括在辣根過氧化物酶催化過氧化氫對金納米棒蝕刻前，添加鹵化物。

3.根據權利要求2所述的測定葡萄糖濃度的方法，其特征在于：所述鹵化物可選自十六烷基三甲基溴化銨或碘化鈉或溴化鈉或溴化銨的任一種。

4.一種葡萄糖檢測反應體系，其組分包含：葡萄糖氧化酶、辣根過氧化物酶、金納米棒、鹵化物與硅膠。

5.根據權利要求4所述的葡萄糖檢測反應體系，其特征在于：所述葡萄糖檢測反應體系中葡萄糖氧化酶的濃度為30—60nM，辣根過氧化物酶濃度為0.5—2μM，鹵化物濃度為1-10mM，金納米棒的濃度按金單質計為0.10—0.20mM，以及余量的硅膠。

6.根據權利要求5所述的葡萄糖檢測反應體系，其特征在于：所述葡萄糖檢測反應體系中還包含有20mM的檸檬酸鹽緩沖液；所述葡萄糖檢測反應體系的pH為3.8—4.1。

7.根據權利要求6所述的葡萄糖檢測反應體系的制備方法，包括以下工序：a.制備金納米棒；b.制備硅酸鹽前體；c.向硅酸鹽前體中添加葡萄糖氧化酶、金納米棒、辣根過氧化物酶、鹵化物及檸檬酸鹽緩沖液；d.固化葡萄糖檢測反應體系。

8.根據權利要求7所述的葡萄糖檢測反應體系的制備方法，其特征在于：所述金納米棒的制備是指將濃度為0.05?M的氯金酸溶液0.025-0.030毫升和濃度為0.1?M十六烷基三甲基溴化銨3-5毫升加入新鮮配制的濃度為0.01M硼氫化鈉溶液0.3毫升形成的晶核后，加入生長溶液所制成的；所述生長溶液其原料包括濃度0.1M抗壞血酸0.05-0.10毫升、濃度0.05M的氯金酸0.1-0.3毫升、濃度0.01M硝酸銀0.10-0.15毫升、濃度1M的鹽酸溶液0.15-0.20?毫升和0.1M?的十六烷基三甲基溴化銨10-20mL。

9.根據權利要求8所述的葡萄糖檢測反應體系的制備方法，其特征在于：還需除去金納米棒中的鹵素，具體為將制得的金納米棒以7000rpm下離心處理20分鐘，棄去上清液。

10.根據權利要求9所述的葡萄糖檢測反應體系的制備方法，其特征在于：制備硅酸鹽前體是指按重量份計，將1-5份的硅酸鈉與10—20份的去離子水混合成硅酸鈉溶液，然后向其加入按重量份計3—8份的陽離子交換樹脂，以除去過酸鈉溶液中的鈉離子和氫離子，直至所述硅酸鈉溶液的pH為3.8—4.1，即獲得所述硅酸鹽前體；所述固化葡萄糖檢測反應體系是指將葡萄糖反應體系置于微孔板中，在4℃下靜置48小時。