[發(fā)明專利]古巴蘭花的快速繁殖方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410215448.5
• 申請日: 2014-05-21
• 公開（公告）號: CN103999771A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 方巖;王培軍;夏羅宏;薛斌
• 申請（專利權(quán)）人: 太原大學(xué)外語師范學(xué)院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G1/00
• 代理公司: 太原晉科知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 鄭晉周

1.?一種古巴蘭花的快速繁殖方法，其步驟為：

制備無性繁殖葉片??選取古巴蘭花植株的球莖上的芽作為外植體，用洗潔精刷洗干凈并用自來水沖洗30min后，在無菌條件下用0.1%HgCl₂表面消毒3min，然后用75%酒精表面消毒30s，最后用無菌水沖洗后，放在MS+5.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤+1.5mg/L的a-萘乙酸+30g/L的蔗糖+7g/L的瓊脂、PH為5.8的培養(yǎng)基中培養(yǎng)誘導(dǎo)成苗，培養(yǎng)條件為：17-23℃、光照強(qiáng)度1000—1500Lux、光周期為15h/d，待小苗長到2-3片葉、葉長5-8cm時，用剪刀將葉片剪為0.8-1.2cm長的葉片，備用：

誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得愈傷組織??以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，再添加0.5-1.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤（6-benzylaminopurine，簡稱6-BA）、0.3-0.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-dichlorophenoxy，簡稱2,4-D）、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂，制成PH為5.8的誘導(dǎo)培養(yǎng)基，將（1）準(zhǔn)備的0.8-1.2cm長的葉片消毒后置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為17-23℃，暗光培養(yǎng)60-65天，直至獲得愈傷組織；?

增殖培養(yǎng)獲得大量的愈傷組織??以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加0.5-1.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）、0.2-0.4mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）、30g/L蔗糖和7g/L瓊脂，制成PH為5.8的增殖培養(yǎng)基，將（2）培養(yǎng)的愈傷組織置于增殖培養(yǎng)基中增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)條件同（2），直至獲得大量愈傷組織；

分化培養(yǎng)??以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加8.0-10.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤、和0.1-0.3mg/L的a-萘乙酸（a-naphthlcetic?acid?，簡稱NAA）、30g/L蔗糖和7g/L瓊脂，制成PH為5.8的分化培養(yǎng)基，將（3）培養(yǎng)的愈傷組織置于分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件是：17-23℃、光照強(qiáng)度為1000—1500Lux、光周期為15h/d，直至愈傷組織分化成葉長為3-4cm的芽苗；

生根培養(yǎng)??以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加0.8-1.0mg/L的a-萘乙酸、30g/L蔗糖和7g/L瓊脂，制備成PH為5.8的生根培養(yǎng)基，將（4）培養(yǎng)的芽苗取單苗置于生根培養(yǎng)基中生根培養(yǎng)，培養(yǎng)條件同（5），直至芽苗生根獲得古巴蘭花生根苗；

煉苗?待（5）培養(yǎng)的小苗根長到1-3cm時，將培養(yǎng)瓶的封口膜打開，煉苗6-8天；

試管苗移栽??試管苗移栽基質(zhì)為泥炭或蛭石，基質(zhì)移栽前用50%多菌靈可濕性粉劑的700-900液進(jìn)行消毒，取出（6）培養(yǎng)的小苗用自來水洗凈根部的培養(yǎng)基，稍晾干表面的水分即可移栽入消毒后的基質(zhì)中，然后搭建拱棚，將拱棚濕度保持在85%-95%、溫度20-25℃，移栽10天后逐漸降低溫度至17-20℃，40天后進(jìn)入常規(guī)管理。