[發明專利]一種遠志糖酯有效部位的制備方法

有效

• 申請號: 201410215399.5
• 申請日: 2014-05-21
• 公開（公告）號: CN104027403A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: 欒連軍;張曉玲;吳永江;劉雪松;施琦淵;陳勇;王龍虎
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K36/69
• 分類號: A61K36/69;A61K125/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

技術領域

本發明屬于中藥領域，涉及一種中藥有效部位的制備方法，尤其涉及一種遠志糖酯有效部位的制備方法。

背景技術

遠志是遠志科植物遠志Polygala?tenuifolia?Willd.或卵葉遠志Polygala?sibirica?L.的干燥根，具有安神益智、交通心腎、祛痰消腫的功效，臨床用于治療心腎不交引起的失眠多夢、健忘驚悸、神智恍惚、咳痰不爽、瘡瘍腫毒、乳房腫痛。化學成分研究表明，遠志所含化學成分主要為皂苷、糖酯、????????????????????????????????????????????????酮、生物堿和脂肪油等。現代藥理學研究表明，遠志皂苷具有祛痰止咳的作用，也是遠志的主要毒性成分（具有明顯的胃刺激作用和溶血作用）；遠志酮具有抗真菌和止痛的作用；遠志糖酯被認為與遠志改善認知和腦保護作用有關。Ikeya等（Biol.?Pharm.?Bull.,?2004,?27(7),?1081-1085.）研究發現，遠志糖酯能顯著縮短KCN致腦缺血小鼠昏迷時間，其中以3,?6’-二芥子酰基蔗糖酯（DISS）和Tenuifoliside?B的活性最好，進一步研究還發現這兩個化合物還具有較好的改善認知活性（東莨菪堿致小鼠癡呆模型）。

已有學者對遠志活性部位的制備工藝進行了研究。姜勇等（中國專利，CN?1640425?A）公開了一種遠志有效部位的制備方法，具體方法如下：將遠志的根或根皮粉碎后，先使用水或/和醇作進行提取，然后上大孔樹脂柱，使用水、甲醇、乙醇、丙酮、或50～95?％的乙醇或丙酮的水溶液進行洗脫，收集洗脫液，干燥，即得含量達50％以上的遠志總苷有效部位。該總苷有效部位以DISS為對照品，采用紫外分光光度法測定總苷含量，總苷含酮苷、糖酯和皂苷。然而，該總苷的三類成分最大紫外吸收波長差別大，分子量差別大（酮苷分子量范圍：200-600；糖酯分為蔗糖單酯、蔗糖雙酯、寡糖多酯，其分子量范圍為：500-1500；皂苷分子量范圍：1000-2000），因此，簡單地以DISS為對照品，采用紫外分光光度法測定遠志總苷含量，其專屬性和準確度還有待進一步驗證。其次，由于總苷含有的酮苷、糖酯和皂苷三類成分的藥理作用不同，這種混合的有效部位影響其在新藥研發中的應用。王磊等（中國專利，CN?102526215?A；CN?102451442?A）公開了一種去除遠志毒性成分保留有效組分的提取工藝。該學者采用AB-8大孔吸附樹脂對遠志提取物進行了純化，去除所含的胃刺激成分皂苷，保留了糖酯和酮等成分，但該方法未對所得提取物進行質量控制，提取物中可控成分含量不明，不符合我國藥品注冊法規對有效部位（即中藥五類）新藥的要求，只能作為一般粗提取物應用。

發明內容

本發明的目的是提供一種遠志糖酯的制備方法，通過以下步驟實行：

（1）提取：以遠志藥材為原料，采用乙醇溶液回流法進行提取，具體為：以遠志藥材質量6~12倍量的50~80?%乙醇溶液為提取溶劑，回流提取2~3次，每次1-2?h，合并提取液，60?℃減壓濃縮至無醇味，得到遠志提取物。

（2）大孔樹脂純化：采用D130大孔樹脂對步驟（1）所得的遠志提取物進行純化。上樣液的濃度為含生藥0.25?g/ml，上樣速度為2~3?Bv/h，上樣量為2~4?Bv；在洗脫過程中先用4~6?Bv的水進行沖洗，水洗速度為4?Bv/h，接著用4~6?Bv的濃度為20?%的乙醇溶液進行洗脫，洗脫速度為2?Bv/h，然后用4~6?Bv的濃度為35?%的乙醇溶液進行洗脫，洗脫速度為1~3?Bv/h。35?%乙醇溶液洗脫液，減壓濃縮至無醇味（60?℃），得到糖酯富集部位。

（3）乙酸乙酯萃取：采用液液萃取的方法對步驟（2）所得的糖酯富集部位進行純化，糖酯富集部位加水分散得到樣液，濃度為含糖酯1.36~13.61?mg/ml，萃取溶劑為乙酸乙酯，萃取次數3~5次，每次萃取溶劑用量為3倍樣液量。合并乙酸乙酯層，減壓濃縮至干（60?℃），即得遠志糖酯有效部位。

進一步地，步驟（1）提取溶劑的用量為遠志藥材質量的8倍，乙醇溶液的濃度為70?%，回流提取2次，每次1.5?h。

進一步地，步驟（2）中上樣速度為2?Bv/h，上樣量為4?Bv。較優的洗脫過程為：先用5?Bv的水進行沖洗，水洗速度為4?Bv/h，接著用5?Bv的濃度為20?%的乙醇溶液進行洗脫，然后用6?Bv的濃度為35?%的乙醇溶液進行洗脫，洗脫速度為2?Bv/h。

進一步地，步驟（3）中樣液的濃度為含糖酯6.81?mg/ml，萃取次數為4次。