[發明專利]一種狂犬病病毒單克隆抗體及其應用

無效

• 申請號: 201410214232.7
• 申請日: 2014-05-20
• 公開（公告）號: CN103954777A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 邢江峰
• 申請（專利權）人: 北京凱思百奧科技發展有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/569
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 王玉松

1.一種狂犬病病毒單克隆抗體，其特征在于：其具有中和活性，特異性識別狂犬病病毒糖蛋白G。

2.根據權利要求1所述的狂犬病病毒單克隆抗體，其特征在于：所述單克隆抗體為IgG1亞型。

3.根據權利要求1所述的狂犬病病毒單克隆抗體，其特征在于：所述單克隆抗體是以狂犬病病病毒CVS株滅活病毒為免疫原制備得到的。

4.一種穩定產生權利要求1-3任一項所述的狂犬病病毒單克隆抗體的雜交瘤細胞系。

5.權利要求4所述的雜交瘤細胞系的建立方法，包括步驟：基礎免疫、加強免疫、制備雜交瘤細胞以及建立雜交瘤細胞系，其特征在于：所述基礎免疫和加強免疫中采用的免疫原為狂犬病病毒的CVS株滅活病毒；免疫后經過亞克隆和RFFIT篩選，得到具有中和狂犬病病毒活性的、穩定分泌單克隆抗體的雜交瘤細胞系。

6.根據權利要求4所述的雜交瘤細胞系，其特征在于：所述雜交瘤細胞系在含有10％胎牛血清的DMEM培養基中培養后，培養液上清的中和活性效價為大于等于5.0IU/ml。

7.含有權利要求1-3任一項所述的單克隆抗體的膠體金檢測試紙卡或試紙條。

8.根據權利要求7所述的膠體金檢測試紙卡或試紙條，其特征在于：將純化的單克隆抗體與馬抗狂犬病病毒IgG抗體作為二抗分別固定在硝酸纖維素膜及玻璃纖維素膜上，組成狂犬病病毒免疫膠體金雙抗體夾心法檢測試紙卡或試紙條。

9.根據權利要求8所述的膠體金檢測試紙卡或試紙條，包括加樣孔，其特征在于：加樣孔下設有濾過墊，反應區包被有純化的單克隆抗體膠體金偶聯標記物，檢測線包被有馬抗狂犬病病毒IgG抗體，質控線包被有兔抗鼠免疫球蛋白，質控線側貼有吸水墊。

10.根據權利要求9所述的膠體金檢測試紙卡或試紙條的使用方法，其特征在于：取待檢樣品100μl，滴在試紙卡或試紙條的加樣孔中，根據檢測線和質控線是否出現色帶來確定樣品內是否存在狂犬病病毒。