[發明專利]一種制備冬蟲夏草多糖肽的方法在審
| 申請號: | 201410213401.5 | 申請日: | 2014-05-20 |
| 公開(公告)號: | CN104151395A | 公開(公告)日: | 2014-11-19 |
| 發明(設計)人: | 黃宏南;林冬梅;王賽貞;羅虹建;林樹錢 | 申請(專利權)人: | 黃宏南 |
| 主分類號: | C07K1/36 | 分類號: | C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16 |
| 代理公司: | 福州市眾韜專利代理事務所(普通合伙) 35220 | 代理人: | 陳智雄;黃秀婷 |
| 地址: | 350000 福建省福*** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 制備 冬蟲夏草 多糖 方法 | ||
1.一種制備冬蟲夏草多糖肽的方法,其特征在于,該方法包括以下步驟:
(1)取以冬蟲夏草純粉為原料的水提取液,將其濃縮、離心、透析、截留而獲得的含有高分子量多糖肽;
(2)取步驟(1)中濃度為1%的含有高分子量多糖肽的冬蟲夏草多糖肽溶液,在不斷攪拌中緩慢滴加無水乙醇至體積百分比為1∶0.5,置3℃~5℃溫度下存放12-20h,用10000-12000rpm離心,用無水乙醇分級沉淀,收集33%乙醇沉淀部分,置冰箱真空干燥得第1級成分為冬蟲夏草多糖肽1;
(3)取(2)步驟中的冬蟲夏草多糖肽1上清液再滴加無水乙醇至體積百分比為1︰1,用無水乙醇分級沉淀,收集33~50%的沉淀,置3℃~5℃溫度下存放12-20h,真空干燥后得第2級成分為冬蟲夏草2;將冬蟲夏草2上清液繼續再加乙醇至體積百分比為1︰1.5,得第3級成分冬蟲夏草3,置真空干燥得冬蟲夏草多糖肽粗品;
(4)取冬蟲夏草多糖肽粗品以1∶10比例加水微熱溶解,離心去雜,通過聚丙烯胺凝膠至少2次柱分離,用含50mol·L-1NaCl的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液,透析12~20h,取袋內液濃縮,用三倍無水乙醇沉淀,離心,收集沉淀部分,在-16℃~-20℃溫度下干燥,得淺褐色粉末狀物質為冬蟲夏草多糖肽。
2.按照權利要求1所述的一種制備冬蟲夏草多糖肽的方法,其特征是:經HPLC制備單峰,并用HPLC-PDA/ELSD檢測結果為冬蟲夏草多糖肽單峰,純度在95%以上。
3.按照權利要求1所述的一種制備冬蟲夏草多糖肽的方法,其特征是:所述步驟(4)中采用10000-12000rpm離心去雜。
4.按照權利要求1所述的一種制備冬蟲夏草多糖肽的方法,其特征是:所述步驟(4)中的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液其pH=5.8-6.0,濃度為0.2mol/L時效果最佳。
5.按照權利要求1所述的一種制備冬蟲夏草多糖肽的方法,其特征是:所述步驟(4)中聚丙烯胺凝膠采用Bio-Gel系列時效果最佳。
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