[發明專利]高通量多通道低豐度生物分子的磁傳感識別方法

有效

• 申請號: 201410213233.X
• 申請日: 2014-05-20
• 公開（公告）號: CN104034881A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: 章偉;胡雪峰
• 申請（專利權）人: 南京益得冠電子科技有限公司
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N27/72
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 鄧唯

1.一種高通量多通道低豐度生物分子的磁傳感識別方法，其特征在于，包括如下步驟：

第1步、磁納米粒子的表面修飾：在磁納米粒子上包覆殼層，所述的殼層的材料是惰性金屬、高分子聚合物或者二氧化硅，得到表面修飾的磁納米粒子；

第2步、磁粒子的表面生物功能化：在第1步所得的表面修飾的磁納米粒子上包覆上鏈霉親和素，得到探測探針；

第3步、磁傳感器薄膜的沉積：利用薄膜真空沉積方法制作磁傳感器薄膜；

第4步、磁傳感器微納米制造：將磁傳感器薄膜制造成傳感器陣列，并在傳感器的兩端安裝釘扎層器件結構；

第5步、標定磁傳感器的磁電阻：對第4步制得的傳感器進行磁電阻的測定；

第6步、磁量子傳感器的表面修飾：在磁傳感器上依次進行金屬氧化物和高分子多表面層的修飾，再在高分子多層表面層上鍵合要檢測的生物分子抗原對應的抗體，得到鍵合抗體的磁量子傳感器；

第7步、生物分子與傳感器的偶聯：將設定濃度的需要檢測的生物分子作為抗原偶聯在第6步所得的磁量子傳感器的抗體上；

第8步、分析抗體與生物素的偶聯：將要檢測的生物分子抗原對應的抗體與生物素偶聯；

第9步、將第8步得到的偶聯生物素的抗體與第7步所得的磁量子傳感器通過抗原-抗體結合，得到有抗體-抗原-生物素偶聯抗體的磁量子傳感器；

第10步、探測探針的偶聯：將第2步得到的探測探針偶聯至第9步中得到有生物素偶聯的抗體上；

第11步、偶聯和非偶聯磁性探針的磁分離：開啟磁場，將沒有和有生物素偶聯的磁量子傳感器偶聯的探測探針從傳感器表面分離；

第12步、標準曲線的繪制以及生物分子的測定：測定第11步所得的磁量子傳感器的磁電阻，與事先在第5步標定的磁電阻進行比較，得到來自磁探針的響應；

第13步、改變抗原的濃度，重復第7步-第12步，得到抗原的濃度與磁電阻值之間關系的標準曲線；

第14步、對待測樣本進行測定，通過標準曲線計算得到待測樣本中抗原的濃度。

2.根據權利要求1所述的高通量多通道低豐度生物分子的磁傳感識別方法，其特征在于，所述的生物分子是可以通過免疫學方法連接的生物大分子、生物標記物、細菌、激素或者農藥。

3.根據權利要求1所述的高通量多通道低豐度生物分子的磁傳感識別方法，其特征在于：所述的磁納米粒子是指：超順磁性Fe₃O₄或者MFe₂O₄，所述的M是指Mn、Mg、Fe、Co、Ni或者Zn中的一種；或者是鐵磁性的金屬元素或者其合金，所述的合金是指：FeCo、FeNi、CoNi或者FeCoNi。

4.根據權利要求1所述的高通量多通道低豐度生物的磁傳感識別方法，其特征在于，所述的第2步中，是通過AEAPS磁性納米粒子表面偶聯方法進行鏈霉親和素的包覆。

5.根據權利要求1所述的高通量多通道低豐度生物分子的磁傳感識別方法，其特征在于：所述的磁傳感器是各向異性磁電阻傳感器、電線圈感應傳感器、巨磁阻傳感器或者自旋電子隧穿傳感器中的一種。

6.根據權利要求1所述的高通量多通道低豐度生物分子的磁傳感識別方法，其特征在于：第3步中，通過等離子化學氣相沉積法在磁傳感器上修飾金屬氧化物層；通過聚烯丙基胺溶液化學反應方法沉積高分子層。