[發明專利]一種山羊肉用性狀快速高效選育方法

無效

• 申請號: 201410211282.X
• 申請日: 2014-05-19
• 公開（公告）號: CN104017865A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發明（設計）人: 肖禮華;徐紅;徐云峰;曾瓊;楊方福;趙文金;趙維
• 申請（專利權）人: 習水縣富興牧業有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;A01K67/027
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 谷慶紅

1.一種山羊肉用性狀快速高效選育方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)性能測定：主要對山羊肉用性狀的主要指標體重進行測定；測定時，要記錄好每只山羊的體重、性別、年齡、耳標號，并收集山羊的系譜資料；所述的體重測定時，羊只禁食16～24h，禁飲2h后空腹稱測山羊的重量，單位為kg；

(2)DNA樣采集：按常規方法采集每只山羊的血樣或耳組織樣，并提取樣品DNA，每只山羊的DNA樣要與其耳標號一一對應；

(3)標記基因引物合成：將DNA樣合成包含目的基因中與山羊體重顯著相關的SNP位點的特定引物；

(4)模板PCR擴增引物：將2×Taq?PCR?MasterMix、ddH₂O、引物、模板DNA混合構建成PCR反應體系，其中2×Taq?PCR?MasterMix為5μL、ddH₂O為3.4μL、引物為0.8μL、模板DNA為0.8μL；混合均勻后，進行PCR擴增，獲得擴增產物；

(5)基因型判定與分型：將擴增產物在99℃下變性5min后，置于10％的聚丙烯酰胺凝膠上進行電泳，電泳完畢后，進行硝酸銀染色拍照，并根據電泳結果直接判定個體基因型；

(6)不同基因型個體PCR產物的測序驗證：對不同基因型個體各5個50μL擴增體系，經瓊脂糖凝膠檢測，有目的條帶后，進行基因純化測序；記錄各個個體的基因型，均與體重、DNA樣、個體耳標號要一一對應；

(7)個體MBLUP遺傳評估：將各個體系譜、年齡、性別、基因型和體重信息納入標記輔助BLUP(MBLUP)模型估計出各個個體的育種值，其模型如下：

y＝Zu+Qν+e

其中：y為體重測量值向量；u為育種值隨機向量，其均值為0，方差協方差矩陣為

ν是固定分子標記效應向量，e為誤差向量，其均值為0，方差協方差矩陣為

Z、Q是相應的關聯矩陣；

隨機向量u和誤差向量e的數學期望和方差定義為：

Eue=00Varue=G,00,R,G=AσA2,σe2=σy2-σA2=σy2(1-h2)]]>

A為所有個體的血緣系數矩陣，為個體育種值方差；

(8)山羊選配建立家系：以公羊為單位，選取育種值較近的山羊作為家系建立個體(各家系公羊育種值不能低于母羊育種值，公母羊之間應避免近交，公母羊三代內無共親關系)，每個家系母羊≥15只，至少建立30個家系；

(9)山羊群體繼代選育形成核心群體：按照山羊肉用性狀快速高效選育目標，在步驟8)的家系后代中進行體重測定和基因型檢測，以MBLUP法進行群體繼代選育，重復步驟1-8)≥二世代后，即可獲得山羊肉用核心群體；

(10)優良基因人工擴散：在核心群體中，母羊直接送到保種區去作種羊；公羊采用人工授精的方式，在山羊群體中進行山羊擴繁。