[發明專利]鑒別8種豬病毒病的GeXP快速檢測試劑盒及其引物組

有效

• 申請號: 201410210880.5
• 申請日: 2014-05-19
• 公開（公告）號: CN103981286A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 謝芝勛;張民秀;謝麗基;羅思思;劉加波;謝志勤;鄧顯文;龐耀珊;范晴
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區獸醫研究所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 楊立華

1.鑒別8種豬病毒病的GeXP快速檢測引物組，其特征在于包括九對特異性引物，分別是引物對SIV-M-1和SIV-M-2、引物對SIV-H1-1和SIV-H1-2、引物對SIV-H3-1和SIV-H3-2、引物對PRV-1和PRV-2、引物對CSFV-1和CSFV-2、引物對PRRSV-1和PRRSV-2、引物對JEV-1和JEV-2、引物對PPV-1和PPV-2、引物對PCV-1和PCV-2，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.18的堿基序列。

2.根據權利要求1所述的鑒別8種豬病毒病的GeXP快速檢測引物組，其特征在于還包括一對通用引物，分別是上、下游通用引物Cy5-Tag-F和Tag-R，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.19至SEQ.ID.No.20的堿基序列。

3.鑒別8種豬病毒病的GeXP快速檢測試劑盒，包括反轉錄RT反應液、PCR反應液、DEPC水、超純水，其特征在于：所述PCR反應液中含有九對特異性引物和一對通用引物，分別是引物對SIV-M-1和SIV-M-2、引物對SIV-H1-1和SIV-H1-2、引物對SIV-H3-1和SIV-H3-2、引物對PRV-1和PRV-2、引物對CSFV-1和CSFV-2、引物對PRRSV-1和PRRSV-2、引物對JEV-1和JEV-2、引物對PPV-1和PPV-2、引物對PCV-1和PCV-2以及上、下游通用引物Cy5-Tag-F和Tag-R，它們分別具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.20的堿基序列。

4.根據權利要求3所述的鑒別8種豬病毒病的GeXP快速檢測試劑盒，其特征在于：所述九對特異性引物SIV-M-1和SIV-M-2、引物對SIV-H1-1和SIV-H1-2、引物對SIV-H3-1和SIV-H3-2、引物對PRV-1和PRV-2、引物對CSFV-1和CSFV-2、引物對PRRSV-1和PRRSV-2、引物對JEV-1和JEV-2、引物對PPV-1和PPV-2、引物對PCV-1和PCV-2在PCR反應體系中對應的的摩爾濃度分別為50nmol/L，50nmol/L，100nmol/L，50nmol/L，50nmol/L，50nmol/L，50nmol/L，50nmol/L，50nmol/L；所述通用引物在PCR反應體系中的摩爾濃度為500nmol/L。

5.根據權利要求4所述的鑒別8種豬病毒病的GeXP快速檢測試劑盒，其特征在于：所述反轉錄RT反應液每管9μL，含有5×Reverse?Transcriptase?Buffer5μL、50pmol?Random?Primer(9mer)1μL、10mM?dNTP?Mixture2μL、40U?Ribonuclease?Inhibitor?0.5μL和5U/μL?AMV?Reverse?Transcriptase0.5μL；所述PCR反應液每管10.7μL，含有10×PCR?buffer2.5μL，25mM?MgCl₂2.5μL，2.5mM?dNTP?Mixture2μL，9對特異性引物混合物1.25μL，10μM/L上、下游通用引物混合物1.25μL，JumpStart?Taq?DNA?Polymerase1.2μL；所述DEPC水和超純水各1mL。

6.根據權利要求1或3所述的鑒別8種豬病毒病的GeXP快速檢測引物組或試劑盒，其特征在于：所述8種豬病毒病的病原分別是H1亞型豬流感病毒、H3亞型豬流感病毒、豬偽狂犬病毒、豬瘟病毒、美洲型豬繁殖與障礙綜合征病毒、豬乙腦病毒、豬細小病毒、豬圓環病毒2型。