[發明專利]一種用于抑制鵝坦布蘇病毒感染細胞的多肽及其應用

有效

• 申請號: 201410208557.4
• 申請日: 2014-05-16
• 公開（公告）號: CN103980352A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 趙冬敏;李銀;劉宇卓;黃欣梅;韓凱凱;楊婧
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C07K14/18
• 分類號: C07K14/18;C12N15/40;A61K38/16;A61P31/14
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;傅婷婷

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，涉及一種用于抑制鵝坦布蘇病毒感染細胞的多肽及其應用。

背景技術

鵝坦布蘇病毒屬于黃病毒科、黃病毒屬，該病毒引起坦布蘇病毒病，又稱產蛋下降綜合癥、傳染性卵巢炎，是以產蛋率、采食量顯著下降，出現腦炎樣神經癥狀為特征的新型傳染病。國內已有多位學者報道該病毒對鴨、鵝、雞等家禽均有致病力(黃欣梅，李銀，趙冬敏等.新型鵝黃病毒JS804毒株的分離與鑒定.江蘇農業學報，2011，27(2)：354-360；蘇敬良.鴨的新型黃病毒BYD引起的產蛋下降綜合征.獸醫導刊，2011，4：27-29；陳仕龍，陳少鶯，王劭等.一種引起蛋雞產蛋下降的新型黃病毒的分離與初步鑒定.福建農業學報，2011，26(2)：170-174；李玉峰，馬秀麗，于可響等.一種從鴨新分離的黃病毒研究初報，畜牧獸醫學報，2011，42(6)：885-891)。該病的發病率可高達100％，死亡率在5％～10％之間(滕巧泱，顏丕熙，張旭等.一種新的黃病毒導致蛋鴨產蛋下降及死亡.中國動物傳染病學報，2010，18(6)：1-4.萬春和，施少華，程龍飛，等.一種引起種(蛋)鴨產蛋驟降新病毒的分離與初步鑒定.福建農業學報，2010，25(6)：663-666)。自2010年4月在我國暴發并迅速傳播到國內主要家禽養殖地區，給我國鴨鵝養殖業造成嚴重經濟損失。

作為一種新發疫病，鵝坦布蘇病毒病發病急，傳播迅速，目前尚無有效的疫苗可用，藥物治療效果也不理想，臨床上較難控制。雖然已有鴨坦布蘇滅活疫苗和弱毒疫苗的相關文獻報道，但是仍處于實驗室研究階段，未進行臨床應用。此外，抗鴨坦布蘇病毒卵黃抗體以及抗病毒藥物的治療效果并不理想。

鵝坦布蘇病毒屬于黃病毒家族成員，該屬病毒主要包括幾種重要的人類病原體，包括登革病毒、西尼羅病毒和乙型腦炎病毒等。目前為止，該屬病毒沒有感染的特異性療法，難以通過疫苗接種進行控制。

黃病毒是帶有囊膜的單股正鏈RNA病毒，其囊膜蛋白E屬于II類融合蛋白，介導病毒與受體的結合以及病毒膜融合過程。囊膜病毒感染靶細胞采用相似的入胞機制，即病毒E蛋白與宿主細胞受體結合后，啟動E蛋白構象變化，折疊形成三聚體結構，拉近病毒囊膜與細胞膜距離，引發兩膜融合，隨后病毒基因組釋放到宿主細胞內感染宿主。

鵝坦布蘇病毒病屬于新發傳染病，相關研究尚屬空白，目前鵝坦布蘇病毒感染細胞機制尚未明確，也沒有能特異性地抑制病毒感染的多肽抑制劑。因此，鑒定鵝坦布蘇病毒感染的多肽抑制劑將有助于了解鵝坦布蘇病毒的入胞機制，并對坦布蘇病毒病的防控以及抗病毒藥物的設計具有重大意義。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述不足，提供一種用于抑制鵝坦布蘇病毒感染細胞的多肽抑制劑。

本發明的目的可通過以下技術方案實現：

一種用于抑制鵝坦布蘇病毒感染細胞的多肽，其氨基酸序列選自SEQ?ID?No.1所示的氨基酸序列或者SEQ?ID?No.1所示序列的截短序列，所述的SEQ?ID?No.1所示序列的截短序列至少包括SEQ?ID?NO.2所示序列；優選如SEQ?ID?NO.2所示序列。

編碼本發明所述的多肽的基因。

本發明所述的基因核苷酸序列優選如SEQ?ID?NO.3所示。

含有本發明所述基因的重組表達載體。

本發明所述的多肽、基因或重組表達載體在制備抗鵝坦布蘇病毒藥物中的應用。

一種抗鵝坦布蘇病毒的藥物組合物，包含本發明所述的多肽。

制備本發明所述多肽的方法，通過人工直接合成或通過體外表達獲得。例如通過含有在適當的轉錄啟動子控制下的編碼所需肽的重組核酸分子的微生物表達肽，以及從所屬微生物收集所需肽。

有益效果：

為了實現上述目的，本發明以鵝坦布蘇病毒囊膜蛋白E為設計基礎，用合成多肽競爭結合鵝坦布蘇病毒特異性受體，干擾鵝坦布蘇病毒與靶細胞特異性受體的結合，從而抑制鵝坦布蘇病毒感染靶細胞。結果表明，SEQ?ID?No.1所示的多肽具有干擾鵝坦布蘇病毒與靶細胞特異性受體結合的作用，并呈現抑制鵝坦布蘇病毒感染細胞的作用。本領域技術人員可以根據上述方法設計出基于SEQ?ID?No.1的截短物或類似物，用以干擾鵝坦布蘇病毒與靶細胞特異性受體的結合。

本發明提供的多肽，通過抑制病毒與靶細胞特異性受體的結合來抑制鵝坦布蘇病毒的感染，而對宿主本身不產生影響和副作用，使得該多肽具有很高的特異性和更好的應用前景。

附圖說明