[發明專利]聚胸腺嘧啶模板、基于聚胸腺嘧啶模板的熒光銅納米簇及其制備方法、ATP的檢測方法

在審

• 申請號: 201410208517.X
• 申請日: 2014-05-16
• 公開（公告）號: CN105087765A
• 公開（公告）日: 2015-11-25
• 發明（設計）人: 蔡林濤;吳亞運;張鵬飛;高篤陽;陳馳
• 申請（專利權）人: 深圳先進技術研究院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10;B22F9/24
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;熊永強

技術領域

本發明涉及納米材料以及分子檢測領域，具體涉及一種聚胸腺嘧啶模板、一種基于聚胸腺嘧啶模板的熒光銅納米簇及其制備方法、和一種ATP的檢測方法。

背景技術

ATP對許多酶的活性有著重要影響，其增加或減少都會引起各種疾病，如低氧、低血糖、帕金森癥以及惡性腫瘤等。因此，ATP的簡單快速檢測對相關疾病的治療是至關重要的。目前檢測ATP的方法主要是采用熒光素和熒光素酶檢測。雖然其檢測精度高，但成本高昂，而且步驟相對復雜，不適合快速檢測。

因此，有必要提供一種成本低，而且簡單易行，能快速、高靈敏檢測ATP的方法。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種聚胸腺嘧啶模板及其應用。本發明還提供了一種基于聚胸腺嘧啶模板的熒光銅納米簇及其制備方法和應用。本發明還提供了一種ATP的檢測方法。

本發明提供的聚胸腺嘧啶模板能用于制備熒光銅納米簇；且制備成本低、操作簡便。本發明提供的ATP的檢測方法在生物醫學研究和疾病早期診斷方面具有廣闊的應用價值，不僅成本低，而且檢測步驟簡單易行，現象明顯，易于觀察，能快速、高靈敏檢測樣品中ATP的濃度。

本發明所述“ATP”是指三磷酸腺苷。

本發明所述“DNA”是指脫氧核糖核苷酸。

本發明所述的“A”、“T”、“C”、“G”、“U”分別為腺嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶、鳥嘌呤、胞嘧啶。

本發明所述的“(Y)n”表示n個Y序列，Y為腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)或鳥嘌呤(G)。

第一方面，本發明提供了一種聚胸腺嘧啶模板，所述聚胸腺嘧啶模板為單鏈DNA序列，所述聚胸腺嘧啶模板包括至少一個聚胸腺嘧啶序列，所述聚胸腺嘧啶序列為(T)n，其中，所述n的取值范圍為15～40之間的自然數。

具體地，本發明所述的“(T)n”表示n個T序列。

具體地，當n為25時，所述聚胸腺嘧啶序列為(T)25，所述(T)25的序列如SEQIDNO:1所示。

優選地，所述聚胸腺嘧啶模板還包括至少一個聚胞嘧啶序列。

進一步優選地，所述聚胞嘧啶序列為“(C)m”，所述m的取值范圍為5～20之間的自然數。

具體地，當n為10時，所述聚胞嘧啶序列為(C)n為(C)10，所述(C)10的序列如SEQIDNO:2所示。

進一步優選地，所述聚胸腺嘧啶模板中，所述聚胞嘧啶序列和所述聚胸腺嘧啶序列依次間隔排列，且所述聚胞嘧啶序列的兩側為所述聚胸腺嘧啶序列。

更進一步優選地，所述聚胞嘧啶序列的重復次數為1～3次。

具體地，當所述聚胞嘧啶序列的重復次數為1次時，所述聚胸腺嘧啶模板的序列如SEQIDNO:3所示。

具體地，當所述聚胞嘧啶序列的重復次數為2次時，所述聚胸腺嘧啶模板的序列如SEQIDNO:4所示。

優選地，所述聚胸腺嘧啶模板還包括至少一個聚鳥嘌呤序列。

進一步優選地，所述聚鳥嘌呤序列為“(G)q”，所述q的取值范圍為5～20之間的自然數。

進一步優選地，所述聚胸腺嘧啶模板中，所述聚胞嘧啶序列和所述聚鳥嘌呤序列依次間隔排列，且所述聚鳥嘌呤序列的兩側為所述聚胸腺嘧啶序列。

更進一步優選地，所述聚鳥嘌呤序列的重復次數為1～3次。

優選地，所述聚胸腺嘧啶模板還包括至少一個10～20個堿基長度的隨機序列。

進一步優選地，所述聚胸腺嘧啶模板中，所述聚胞嘧啶序列和所述隨機序列依次間隔排列，且所述隨機序列的兩側為所述聚胸腺嘧啶序列。

更進一步優選地，所述隨機序列的重復次數為1～3次。

在此優選條件下，所述聚胸腺嘧啶模板的序列優選為如SEQIDNO:6、SEQIDNO:7或SEQIDNO:8所示。

優選地，所述聚胸腺嘧啶模板的5’端連接有生物素標記或鏈霉親和素標記。

在此在此優選條件下，所述生物素標記或鏈霉親和素標記通過行業內常規操作修飾在聚胸腺嘧啶模板的5’端。

在此優選條件下，所述聚胸腺嘧啶模板的序列優選為T25-biotin，其中，所述T25的序列如SEQIDNO:1所示。

具體的，所述T25-biotin表示在SEQIDNO:1所示序列的5’端標記生物素標簽。