[發明專利]一種須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法

有效

• 申請號: 201410205461.2
• 申請日: 2014-05-15
• 公開（公告）號: CN103948639A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 劉彥威;劉娜;劉利強;杜鵑;石玉祥;張永英;王慧真
• 申請（專利權）人: 河北工程大學
• 主分類號: A61K36/06
• 分類號: A61K36/06
• 代理公司: 石家莊元匯專利代理事務所(特殊普通合伙) 13115
• 代理人: 劉聞鐸

技術領域

本發明涉及一種動物模型的構建方法，具體涉及一種須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法，屬于生物技術領域。

背景技術

須癬毛癬菌(Trichophyton?mentagrophytes)是淺部真菌病的最常見病原菌之一，能引起傳染性人畜共患的接觸性皮膚真菌疾病。自Priestley報告本病以來，世界各地均有陸續報道。它主要侵犯皮膚、粘膜及其附屬物(毛、羽毛、爪等)，引起皮膚、毛發、甲板感染，導致皮屑增多、結痂、脫毛、滲出、毛囊炎及癢感等癥狀。雖然這種感染很少是致命性的，但常常造成巨大的經濟損失，更重要的是可能感染人，并在人群間傳播。

人和兔、狐貍、貓、狗、馬、牛、羊及雞均可感染須癬毛癬菌，但主要侵害的是兔，在世界范圍內須癬毛癬菌是兔等動物第一大常見的皮膚癬菌，是人第二大常見的皮膚癬菌。隨著養兔業轉型與升級，兔須癬毛癬菌的發生也越來越引起人們的高度重視，據報道，在一些發病兔場，仔兔生長速度下降15％～30％，發病率達40％～100％，死亡率達22％～40％，斷奶后育成率下降20％～50％。國家兔育種委員會把該病列為三大兔病之一。近年來，該病原菌引起的感染已成為危害社會公共衛生領域的一大難題，世界上20％～25％的人群受到該病的困擾。因此，該病已受到國內外醫學界和獸醫學界的高度重視。

但由于沒有相應的須癬毛癬菌感染動物模型，對于人抗皮膚癬菌藥物的藥敏試驗只能在體外進行，而以往的皮膚癬菌的藥敏試驗結果表明，體外藥敏實驗的結果與體內給藥后的療效并不一致。

目前國內外多采用實驗動物小鼠和豚鼠構建的須癬毛癬菌感染模型，菌株用須癬毛癬菌昆克變種，雖然這些實驗動物模型對研究兔須癬毛癬菌感染有參考價值，但畢竟小鼠和豚鼠與兔是有很大差異的，以小鼠和豚鼠作為感染模型與實際還存在一定的差異。

發明內容

為解決現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法，更接近實際,更準確，更具有實用價值。

為了實現上述目標，本發明采用如下的技術方案：

一種須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)接種用真菌懸液的制備：將真菌接種于固體培養基上培養，成熟后刮取培養基表面菌落，移至無菌的PBS，研磨成菌絲段，制備懸液，前述真菌為萬博節皮菌；

(2)動物造模：健康兔，背部剪毛，消毒后，用無菌砂紙磨破其背部皮膚，給予糖皮質激素處理同時涂布真菌懸液，然后向腹腔注射地塞米松，地塞米松注射液的用量為7.5mg/kg，每隔日重復注射1次。

前述須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法，其特征在于，前述真菌懸液中含有分生孢子。

前述須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法，其特征在于，前述真菌懸液的濃度為1×10⁸/mL。

前述須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法，其特征在于，前述固體培養基為SDA培養基。

本發明的有益之處在于：提供了一種須癬毛癬菌感染兔模型的構建方法，此方法具有造模方法簡單，易于操作和推廣的優點；利用本發明的方法獲得的須癬毛癬菌感染兔模型，其更接近實際,更準確，更具有實用價值。

附圖說明

圖1是萬博節皮菌形成的(白色)菌落；

圖2是萬博節皮菌的螺旋菌絲；

圖3是萬博節皮菌的大小分生孢子；

圖4是須癬毛癬菌感染兔模型的組織病理圖。

具體實施方式

1.實驗菌株：萬博節皮菌(Arthroderma?vanbreuseghemii)。

2.實驗動物：健康兔12只，由河北工程大學實驗動物繁殖場提供，平均體重3±0.2kg，雌雄各半。

3.實驗動物分組：按體重、性別隨機分為2組，每組6只，A組為實驗組,B組為空白對照。

4.接種用真菌懸液的制備：將萬博節皮菌，接種于SDA固體培養基，27℃培養。10天后成熟，輕輕刮取培養基表面菌落，移至無菌的PBS，研磨成菌絲段(含分生飽子)懸液，調整濃度為1×10⁸/mL。

5.動物造模：選用健康兔，背部剪毛，常規消毒后，用無菌的粗砂紙輕輕磨破兔背部皮膚，以觀察到點狀滲血為宜；A組給予糖皮質激素處理同時涂布真菌懸液,B組給予糖皮質激素處理同時涂布無菌生理鹽水；然后，向A組和B組實驗兔的腹腔注射地塞米松，地塞米松注射液的用量為7.5mg/kg，每隔日重復注射1次；每日觀察實驗動物接種處皮膚紅斑、脫屑、結癡和毛發生長變化。