[發明專利]一種使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法

無效

• 申請號: 201410203463.8
• 申請日: 2014-05-14
• 公開（公告）號: CN103983709A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 劉佳;王莉;林維政
• 申請（專利權）人: 永信藥品工業（昆山）有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟;侯桂麗

技術領域

本發明涉及藥物檢測技術領域，尤其涉及使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法。

背景技術

骨質疏松癥(OP)是由多種原因引起的，以骨強度降低和骨折危險性增加為特征的一種全身性骨疾病，所述骨折危險性增加歸因于骨的脆性增加。骨強度主要取決于兩個因素：骨礦密度和骨質量。影響骨質量的因素包括骨微結構、骨轉化、損傷積累(如微骨折)和骨的礦化狀況等。骨強度的降低使骨在遭受外力時易發生骨折。隨著人類壽命的延長，老齡化是影響人類健康的新問題。骨質疏松癥及其引起的骨折在當前常見疾病中位居第7位，嚴重威脅著中、老年人的健康，成為全球公共衛生問題。

根據我國“九五”攻關課題對我國五大行政區(華北、華東、中南、西南、東北)48615人(其中7182人用雙能X線吸收測定儀測量腰椎及股骨骨礦密度)的流行病學研究結果表明，在40歲以上人群中，骨質疏松癥及低骨量的患病率女性分別為19.9％和32.4％，男性分別為11.5％和45.8％。60歲以上人群的骨質疏松癥及低骨量患病率女性分別為28.6％和13.8％，男性分別為15％和12.7％。總患病率分別為22.6％和13.3％。據此推測，我國60歲以上骨質疏松癥患者大約為2900萬例，低骨量患者為1700萬例。

雙膦酸類藥物(雙膦酸和雙膦酸鹽)是一種焦磷酸鹽類似物，是將后者中的P-O-P連接用P-C-P連接代替，其為人體富含的焦磷酸化合物的類似物，它在血中濃度低，一經吸收，迅速進入骨組織，吸附于羥磷灰石晶體表面，抑制磷酸鈣結晶形成聚集和溶解，并抑制軟組織異位鈣化，影響破骨細胞的活性。70年代中期開始應用于治療OP，但長期應用會阻止正常骨組織鈣化，增加骨折發生率。80年代后期通過改變其結構，消除了抑制骨鈣化的缺陷，還加強了抑制骨質吸收的功效。雙膦酸鹽療法可增加骨量已被證實，但該藥對骨骼結構損害后的潛在保護作用不清楚，其主要不良反應為胃腸道刺激和腎損害。目前雙膦酸鹽已成為防治OP最具潛力的藥物之一。該類藥物對于治療各種骨骼疾病如惡性高鈣血癥、骨質疏松和變形性骨炎等有很好的療效。

雙膦酸鹽類的藥物的發展按藥效學可分為三代。第一代系不含氮的雙膦酸鹽,最早應用的是依替膦酸鈉(etidronate)，早在20世紀70年代就已用于臨床。由于在治療劑量下長期使用會導致骨軟化，故目前已很少使用。應用最廣泛的第一代雙膦酸鹽是氯屈膦酸鈉。第二代雙膦酸鹽抗骨質吸收的作用明顯優于第一代產品，其以含氨基結構為主要特點，其中帕米膦酸鈉的應用最為廣泛。第三代為異環型含氮雙膦酸鹽，以唑來膦酸為代表，其抗骨吸收的作用更強，臨床應用也更方便。米諾膦酸屬于第三代氮雜芳基雙膦酸鹽衍生物，用于治療骨質疏松，其主要成分為米諾膦酸水合物，化學名為：{1-羥基-2-[咪唑并(1,2-a)吡啶-3-基]亞乙基}雙膦酸一水合物，結構如式1所示。

米諾膦酸作為第三代雙膦酸鹽的最新產品。其在有效性和安全性方面表現的更加突出，該藥物在國內仍處于研發階段。隨著新的雙膦酸類藥物的開發與研制，需要根據藥物特有的結構與性質建立與其相適宜的分析方法，以更好地進行藥物的質量控制。

根據文獻(張曉青，徐智儒等，雙膦酸類藥物的分析[J],中國藥學雜志,2004,39(4):249-252)，該類藥物的主要分析方法包括重量分析法、光譜分析法、色譜分析法和毛細管電色譜法。其中提及對于此類藥物的高效液相分析方法面臨以下難點：①該類藥物含有兩個膦酸基團，具有強極性，在非極性固定相上不保留，因此建立了分析該類藥物的高效離子交換液相色譜法。②雙膦酸類藥物存在多級電離，在離子交換高效液相色譜法中為了保證它們以單一的電離形式保留，需要采用強堿或強酸性流動相。因而這些方法大多以價格昂貴的耐強堿或強酸的陰離子交換柱作為固定相。③大多數雙膦酸類藥物沒有強的生色團，因此該類藥物的色譜分析無通用的方法。

專利US005480875A和文獻(鄔方寧，高效液相色譜法測定米諾膦酸片中米諾膦酸[J],現代藥物與臨床,2011,(26)1:66-67)公開了米諾膦酸藥物高效液相檢測方法的液相色譜條件，然而，該檢測條件不適用本物質，雜質分離度不好，雜質峰數量檢測出較少，理論板數低，不能準確評估米諾膦酸的質量，數據缺乏真實性、準確性。

發明內容

本發明的目的在于提供一種使用高效液相色譜檢測米諾膦酸的方法，包括以下色譜條件：