[發(fā)明專利]一種從板栗殼中提取純化抑制α-葡萄糖苷酶活性成分的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410201619.9 | 申請日: | 2014-05-13 |
| 公開(公告)號: | CN103948654A | 公開(公告)日: | 2014-07-30 |
| 發(fā)明(設計)人: | 歐陽杰;劉莉;唐新玥;張欣珂;王珺璟 | 申請(專利權)人: | 北京林業(yè)大學 |
| 主分類號: | A61K36/185 | 分類號: | A61K36/185;A61P3/04;A61P3/10 |
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| 地址: | 100083 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 板栗 提取 純化 抑制 葡萄 糖苷酶 活性 成分 方法 | ||
技術領域
本發(fā)明屬于天然產物化學領域,特別涉及一種從板栗殼中提取純化抑制α-葡萄糖苷酶活性成分的方法。
背景技術
板栗殼為殼斗科植物栗(Castanea?mollissima?Blume)的殼斗,為落葉喬木,一般高15~20米,適宜栽種于山地向陽山坡的沙壤土上,我國南北各地廣泛栽培。果實殼斗球形,上有針刺,刺上密被緊貼柔毛,成熟時開裂而散出堅果。
板栗殼的藥理作用主要有抗菌、抗炎、抗凝血、治療慢性支氣管炎和治療菌痢等,現(xiàn)在對板栗殼的研究主要集中在色素和生物活性物質的提取等方面。板栗殼中含有多酚、有機酸、多糖(或甙類)、黃酮(或皂甙類)、植物甾醇(或三萜)、內酯、香豆素(或其甙類)和鞣質等化學成份。板栗殼中的棕色素屬于黃酮類化合物,具有很好的抑菌效果;從板栗殼中提取的多酚具有較高的抗氧化能力(李金鳳等,板栗殼中多酚的提取及體外抗氧化性研究,林產化學與工業(yè),2010,30(1)∶54-58)。
α-葡萄糖苷酶與糖尿病和肥胖癥緊密相關,抑制α-葡萄糖苷酶能有效地降低糖尿病的發(fā)病率。α-葡萄糖苷酶抑制劑通過競爭性抑制小腸粘膜上皮細胞的α-葡萄糖苷酶,延緩腸道對碳水化合物的吸收,減緩餐后血糖升高從而達到對糖尿病的治療。目前已研發(fā)出以α-葡萄糖苷酶抑制劑為基礎的藥物如Acarbose和Miglitol等。多種中藥提取物也表現(xiàn)出對α-葡萄糖苷酶有明顯的抑制作用,有研究指出黃酮類、生物堿類、萜類、酚類等物質能有效地抑制α-葡萄糖苷酶的活性,但是至今尚未發(fā)現(xiàn)有報道稱從板栗殼中分離出具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質。
板栗殼屬于食品加工中的廢棄物,從中提取出具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的化學物質,可以用于治療糖尿病和肥胖癥,這對板栗殼的進一步加工利用和相關藥物和功能性食品的開發(fā),具有一定的指導意義。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種從板栗殼中提取純化抑制α-葡萄糖苷酶活性成分的方法,首先將板栗殼洗凈、烘干、粉碎,用75%(v/v)乙醇回流提取、減壓濃縮、加入水飽和正丁醇溶液萃取,最后用大孔樹脂AB-8進行吸附洗脫,得到具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的多酚提取物。具體步驟如下:
(1)將板栗殼洗凈、烘干、粉碎,按照料液比1∶10(w/v)加入75%(v/v)乙醇,沸騰回流提取2~3次,每次2~4小時;
(2)合并板栗殼提取液,50℃減壓濃縮2~4小時,得到濃縮浸膏;
(3)將濃縮浸膏用水調配成10mg/mL的溶液,然后用4倍體積的水飽和正丁醇萃取3~5次,每次2~4小時;
(4)合并水飽和正丁醇萃取液,于70~80℃減壓濃縮2~4小時,得到濃縮浸膏,再于-70~-90℃冷凍干燥10~24小時,得到粉狀提取物;
(5)將粉狀提取物用水配成0.5mg/mL溶液,用大孔樹脂AB-8進行吸附,用60%(v/v)乙醇以1BV/h的流速洗脫,收集洗脫液;
(6)測定洗脫液對α-葡萄糖苷酶的抑制率和多酚含量,收集酶活抑制率較高的洗脫液,即可得具有抑制該酶活性的板栗殼組分。
附圖說明
圖1是板栗殼提取物大孔吸附樹脂AB-8洗脫液中的多酚含量和對α-葡萄糖苷酶活性抑制率曲線。
具體實施方式
下面的實施例將對本發(fā)明作進一步的解釋,但是本發(fā)明并不僅僅局限于這些實施例,這些實施例不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
實施例1:
(1)將100g板栗殼洗凈、烘干、粉碎,按照料液比1∶10(w/v)加入75%(v/v)乙醇沸騰回流2次,每次2小時;
(2)合并板栗殼提取液,50℃下減壓濃縮2小時,得到濃縮浸膏;
(3)將濃縮浸膏用水調配成10mg/mL的溶液,然后用4倍體積的水飽和正丁醇萃取3次,每次2小時;
(4)合并水飽和正丁醇萃取液,于70℃減壓濃縮2小時,得到濃縮浸膏,再于-70℃冷凍干燥10小時,得到0.5g粉狀提取物;
(5)將粉狀提取物用水配成0.5mg/mL溶液,用大孔樹脂AB-8進行吸附,用60%(v/v)乙醇以1BV/h的流速洗脫,收集洗脫液;
(6)測定不同洗脫管中洗脫液的多酚含量和對α-葡萄糖苷酶的抑制率(圖1),多酚洗脫峰和抑制率的峰值重疊性較好,說明多酚是有效抑制α-葡萄糖苷酶活性的物質,收集酶活抑制率較高的、洗脫體積1.0-1.5BV處的洗脫液,即可得具有抑制該酶活性的板栗殼組分。
實施例2:
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