[發明專利]一種用于黑木耳中蛋白質的提取方法

在審

• 申請號: 201410198315.1
• 申請日: 2014-05-08
• 公開（公告）號: CN103951729A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 于國萍;邵美麗;王宇昕;張莉;隋春霞;張立鋼;穆瑩;齊微微
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于黑木耳中蛋白質提取領域，涉及一種提取黑木耳中蛋白質方法，尤其涉及一種利用多因素試驗對黑木耳蛋白質提取條件優化的方法。

背景技術

人類食用蛋白質主要有兩大類，即植物蛋白和動物蛋白。由于植物蛋白具有周期短、資源豐富、產量大等優點，在食用蛋白中占70％以上，而動物蛋白則不足30％。我國是食用菌生產、出口和消費的大國，黑木耳產量占世界第一位。

黑木耳是一種藥食兼用的真菌。醫學上講，黑木耳具有補血益氣的功效?？捎糜跉庋澨?、血管硬化等疾病的治療。同時，黑木耳也是重要的保健食品，能減緩衰老，增強機體免疫功能，可預防癌癥的發生。但沒有確切的研究表明，黑木耳中哪些成分具有以上的醫療保健功效。

近些年來，國內外對黑木耳的研究，僅局限于對多糖的提取及其性質功效的開發。而對黑木耳中其他成分的研究較少。黑木耳中還含有10％左右的蛋白質以及鈣、鉀、胡蘿卜素等人體所需的營養成分，對人們的身體健康有著重要的作用。通過對黑木耳蛋白質的性質進行進一步的研究，可提高大眾對黑木耳的深度了解。隨著對黑木耳蛋白質的研究，也增加了黑木耳的食用附加值。同時，對黑木耳產品的開發提供了一定的營養理論依據。

發明內容

本發明的目的是提供一種提取黑木耳中蛋白質的方法，并對提取條件進行優化，獲得最佳條件組合，從而最大限度地提高黑木耳蛋白質的提取率。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

一種用于黑木耳中蛋白質的提取方法，采用堿溶酸沉的方法進行提取，其步驟如下：將黑木耳粉末與水按照液料比為1∶60-100g/mL的比例進行混合，將混合液的pH值調至堿性(9.5-11.5)，在溫度為30-50℃的條件下提取1.0-3.0h后，離心取上層清液，然后將清液的pH值調至2.0-4.0(即：黑木耳蛋白質等電點附近)，再離心取沉淀，即為黑木耳蛋白質粗品。

本發明研究了料液比、提取溫度、提取pH值、提取時間對黑木耳蛋白質提取率的影響。在單因素試驗結果的基礎上，確定了各因素的水平設置范圍，進行多因素試驗。根據試驗結果，確定最優的水平組合。

通過單因素試驗得出，當提取pH值為10.5、提取時間為2.0h、料液比為1∶80g/mL、提取溫度為35℃時，在各個因素下的蛋白質提取率較大。經多因素試驗進一步優化，當提取pH值為10.0、提取時間為2.0h、料液比為1∶90g/mL、提取溫度為40℃時，蛋白質的提取率最大。

黑木耳蛋白質含量相對較高、脂肪與熱量低，開發黑木耳蛋白質新資源，對提高我國國民營養狀況有著積極作用。利用本發明提供的方法提取黑木耳中的蛋白質，在操作方面比較簡便，并且較易控制。同時，提取時所剩余的木耳殘渣，可以做為提取木耳多糖的原料，大大提高了黑木耳的利用率。

附圖說明

圖1為黑木耳蛋白質等電點的測定；

圖2為提取pH值對黑木耳蛋白質提取率的影響；

圖3為提取時間對黑木耳蛋白質提取率的影響；

圖4為料液比(m/V)對黑木耳蛋白質提取率的影響；

圖5為提取溫度對黑木耳蛋白質提取率的影響；

圖6為不同時間、pH值對黑木耳蛋白質提取率的影響；

圖7為不同溫度、料液比對黑木耳蛋白質提取率的影響。

具體實施方式

下面結合附圖對本發明的技術方案作進一步的說明，但并不局限于此，凡是對本發明技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的精神和范圍，均應涵蓋在本發明的保護范圍中。

一、黑木耳蛋白質等電點的測定

稱取20.00g木耳粉，加入1600mL蒸餾水，用0.5mol/L?NaOH溶液調pH值至10.5，在攪拌條件下保溫浸提2.0h后，進行離心，在8000r/min條件下離心30min，取上清液定容至1300mL。用移液管分別吸取上清液200.00mL至六個燒杯中，用0.5mol/L?HCl溶液分別調至2.0、3.0、4.0、5.0、6.0，冷沉24小時后分別吸取下層沉淀進行定氮。由圖1可知，在pH值為3.0時，下層沉淀中蛋白質含量最多。所以，黑木耳蛋白質的等電點應在pH＝3.0這點附近。

二、黑木耳蛋白質的制備