[發(fā)明專(zhuān)利]一種熒光蛋白marker的制備和應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410197289.0
• 申請(qǐng)日: 2014-05-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103923939A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙巧輝;李桂林;郭立攀;李艷姣;付光宇;吳學(xué)煒
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 鄭州伊美諾生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/70
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/70;C12N15/66;G01N27/447
• 代理公司: 鄭州異開(kāi)專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 41114
• 代理人: 王霞

1.一種熒光蛋白marker的制備，其特征在于：包括下述方法：

根據(jù)所需蛋白marker的大小選擇含帶不同融合標(biāo)簽的載體，引物序列視質(zhì)粒和插入序列的設(shè)計(jì)而定，長(zhǎng)度控制在20bp左右；酶切位點(diǎn)依據(jù)不同的質(zhì)粒及GFP基因片段序列而定；將構(gòu)建的質(zhì)粒分別常規(guī)轉(zhuǎn)化,按照廠商推薦的方法分別誘導(dǎo)表達(dá)不同大小的?GFP重組蛋白并純化，即可得到28KD~80KD的熒光蛋白marker，SDS-PAGE檢測(cè)蛋白分子量和純度，常規(guī)蛋白定量備用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光蛋白marker的制備，其特征在于：在構(gòu)建上述表達(dá)載體的基礎(chǔ)上，繼續(xù)插入所需大小蛋白的目的基因進(jìn)行融合表達(dá)；引物序列視質(zhì)粒和插入序列的設(shè)計(jì)而定，長(zhǎng)度控制在20bp左右；酶切位點(diǎn)依據(jù)不同的質(zhì)粒及表達(dá)基因序列而定；將構(gòu)建的質(zhì)粒分別常規(guī)轉(zhuǎn)化,按照廠商推薦的方法分別誘導(dǎo)表達(dá)不同大小的?GFP重組蛋白并分別安排純化，即可得到80KD以上的熒光蛋白marker，SDS-PAGE檢測(cè)蛋白分子量和純度，常規(guī)蛋白定量備用。

3.權(quán)利要求1或2制備的熒光蛋白marker作為示蹤蛋白的應(yīng)用。