[發明專利]測定羊肉中殘留鎮靜劑類獸藥的方法

有效

• 申請號: 201410197253.2
• 申請日: 2014-05-11
• 公開（公告）號: CN103954721A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 魏晉梅;羅玉柱;周圍;解迎雙;劉秀;張麗
• 申請（專利權）人: 甘肅農業大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張真

1.一種測定羊肉中殘留鎮靜劑類獸藥的方法，其特征在于包括以下步驟：

所述的殘留鎮靜劑類獸藥為唑吡坦、氟哌啶醇、氯氮卓、鹽酸異丙嗪、硝西泮、鹽酸氯丙嗪、奮乃靜、鹽酸氟奮乃靜、氯硝西泮、鹽酸甲苯噻嗪、丙酰丙嗪、咔唑心安、乙酰丙嗪、氟哌利多、阿扎哌??；

(1)將羊肉絞碎、混合、均質，貯存于-18～-40℃備用；

(2)取出備用樣品解凍至室溫，準確稱取4.5～5.5g羊肉樣品于50mL聚丙烯離心管中，加入15mL10:90v/v的氨水-乙腈和30μLβ-葡萄糖醛苷酸酶≥100000units/mL，置于黑暗中，35～40℃旋渦、震搖8～12h后，30～40℃超聲萃取10～15min，3500～4500r/min離心5～10min，移出上清液，殘渣中加入15mL10:90，v/v氨水-乙腈，30～40℃超聲萃取10～15min，3500～4500r/min離心5～10min；合并兩次上清液，加入4.0～8.0g?NaCl，充分混合，靜置3～10min，移出上清液，于30～40℃減壓濃縮至近干，加入1mL0.027mol?L^-190:10v/v甲酸水溶液-乙腈渦旋至瓶內殘渣全部溶解，過0.22～0.45μm有機相濾膜后，供分析測定；

(3)液相色譜-串聯質譜儀檢測：色譜柱：Acquity?UPLC?CSH^TM?C₁₈；流動相：A為乙腈，B為0.027mol?L^-1甲酸水溶液，0～15min，A10％→70％，15～16min，A70％→10％，流速0.3～0.5mL?min^-1；進樣量：5～20μL；ESI⁺電離模式；多級反應檢測(MRM)；毛細管電壓：+3.0～3.5kV；離子源溫度：100～150℃；脫溶劑氣溫度：300～380℃；錐孔氣流速：40～55L?h^-1；脫溶劑氣流速：450～550L?h^-1；

(4)制備不同濃度的基質匹配標準工作液，依次進行步驟(3)，以峰面積對濃度進行線性回歸，得到鎮靜劑類藥物的線性回歸方程和相關系數；

(5)將步驟(1)至(3)的樣品色譜峰面積代入鎮靜劑類獸藥基質匹配標準工作液的線性回歸方程，檢出結果。

2.如權利要求1所述的測定羊肉中殘留鎮靜劑類獸藥的方法，其特征在于還包括有在步驟(3)液相色譜-串聯質譜儀檢測中：所述的殘留鎮靜劑類獸藥阿扎哌隆定性離子對為328.4/121m/z；定量離子對為328.4/121m/z；駐留時間0.02～0.05ms；錐孔電壓30～40V；碰撞能量25～35V；

在步驟(4)所述的殘留鎮靜劑類獸藥阿扎哌隆在5～50μg?kg^-1濃度范圍的線性回歸方程和相關系數r²，為：y＝126.98x+114.03；r²＝0.9974；

其中：x為：基質匹配標準工作液濃度；y為：MRM色譜峰面積。

3.如權利要求1所述的測定羊肉中殘留鎮靜劑類獸藥的方法，其特征在于還包括有在步驟(3)液相色譜-串聯質譜儀檢測中：所述的殘留鎮靜劑類獸藥甲苯噻嗪定性離子對為221.1/163.75m/z；定量離子對為221.1/163.75m/z；駐留時間0.02～0.05ms；錐孔電壓25～35V；碰撞能量30～40V；

在步驟(4)所述的殘留鎮靜劑類獸藥甲苯噻嗪在5～50μg?kg^-1濃度范圍的線性回歸方程和相關系數r²為：y＝41.8489x+97.8894?r²＝0.9756；

其中：x為：基質匹配標準工作液濃度；y為：MRM色譜峰面積。