[發(fā)明專利]基因多態(tài)性與重癥患者預后的相關性及研究方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410196808.1
• 申請日: 2014-05-12
• 公開（公告）號: CN103966329A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設計）人: 張丹;陳曉迎
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.CHGA-415/462基因多態(tài)性與重癥患者預后具有相關性。

2.按照權(quán)利要求1所述CHGA-415/462基因多態(tài)性與重癥患者預后具有相關性，其特征在于：-415位點突變組患者比野生組患者生存情況更差，具有更高的30d死亡率。

3.CHGA-415/462基因多態(tài)性與重癥患者預后的相關性研究方法，其特征在于：首先準備全血總DNA提取試劑盒、DNATaq酶、DNA1000Maker以及引物，選擇入住ICU的患者，對患者進行DNA提取并進行CHGA-415/462位點基因型分型；記錄所有患者一般情況，對所有患者進行入住ICU第1d的危重癥評分，以30d死亡率作為評估終點。

4.按照權(quán)利要求3所述CHGA-415/462基因多態(tài)性與重癥患者預后的相關性研究方法，其特征在于：所述全血總DNA提取試劑盒為北京天根生化科技有限公司生產(chǎn)的血液基因組提取試劑盒，貨號DP319，所述DNATaq酶、DNA1000Maker以及引物均購自大連寶生物工程有限公司，引物序列由Primer5軟件設計：上游AGGGAAGGGAGAACAG，下游：CGTTGTCCAGAAGGCAGTAGG。

5.按照權(quán)利要求3所述CHGA-415/462基因多態(tài)性與重癥患者預后的相關性研究方法，其特征在于：所述入住ICU的患者的選擇，排除以下情況的患者：入住ICU不足24h；病例資料不全；未獲得知情同意書簽字；多次入住ICU患者；神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤及腫瘤晚期患者；心肺驟停后復蘇；少數(shù)民族和外籍患者；DNA提取及PCR擴增實驗失敗的患者。

6.按照權(quán)利要求3所述CHGA-415/462基因多態(tài)性與重癥患者預后的相關性研究方法，其特征在于：所述對患者進行DNA提取并進行CHGA-415/462位點基因型分型過程為患者入住ICU后24h內(nèi)，收集患者外周靜脈血5ml按照全血總DNA提取試劑盒說明書進行全血基因組提取，基因型的測定通過PCR目的片段擴增和基因測序判定，按照天根DNA萃取柱提取技術操作使用外周血1ml經(jīng)蛋白酶K處理后提取DNA，DNA濃度為25～30ng/ml，使用70ngDNA作為模板用于目的片段擴增，PCR擴增體系：DNA1.5μl，上下游引物各1.0μl，DNATaq酶預混Mix12.5μl，ddH₂O8μl，目的片段長度為353bp，PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)1.5％瓊脂糖凝膠電泳檢測后進行測序，并進行-415/462SNP位點基因型鑒定，基因型測定為盲法執(zhí)行。

7.按照權(quán)利要求3所述CHGA-415/462基因多態(tài)性與重癥患者預后的相關性研究方法，其特征在于：所述記錄所有患者一般情況包括年齡、性別、感染情況、有無感染、白細胞計數(shù)、降鈣素原、呼吸功能相關情況、循環(huán)情況、肝腎指標；對所有患者進行入住ICU第1d的危重癥評分：APACHEII評分、SAPSII評分、SOFA評分。