[發明專利]一種荔枝核滴丸質量檢測方法

在審

• 申請號: 201410195930.7
• 申請日: 2014-05-09
• 公開（公告）號: CN104820026A
• 公開（公告）日: 2015-08-05
• 發明（設計）人: 郭潔文;鐘世順;黃志剛
• 申請（專利權）人: 廣州市中醫醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 劉婉

技術領域

本發明屬于藥物質量控制領域，具體涉及一種荔枝核滴丸質量檢測方法，特別是一種測定荔枝核滴丸中原花青素含量的方法。

背景技術

原花青素是植物中廣泛存在的一大類多酚化合物的總稱,主要由不同數量的兒茶素和表兒茶素的單體、二聚體、三聚體到十聚體組合而成，擁有較強的氧化和清除自由基的能力及改善人體微循環的功效。現代藥理研究表明,原花青素還具有消炎、抗腫瘤、抗輻射、抗衰老、改善免疫力、改善骨的形成、抗糖尿病、降血脂、降血壓、促進傷口愈合和組織修復活性及抗癌作用(凌志群等，原花青素的藥理學研究進展《中國藥理學通報》,2002年，18卷，第1期:9-12)。初步發現荔枝核中也含大量的原花青素(丁麗等，荔枝核化學成分的研究，《天然產物研究與開發》,2006年,18卷，第6期:45-47)。

中國專利申請CN102836265公開了一種制備荔枝核滴丸制備工藝，工藝為：將荔枝核藥材粉碎，加入8～10倍藥材量的70v/v％乙醇進行超聲提取2次，每次1小時；合并2次的提取液減壓回收乙醇至無醇味后用蒸餾水稀釋以生藥量計濃度為0.4g/ml，靜置過夜；過濾，濾液通過AB-8大孔樹脂吸附，先用水洗脫，繼用75v/v％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液；回收乙醇，繼續濃縮至稠膏后真空低溫干燥，即得荔枝核提取物；按1:4量分別稱取荔枝核提取物和基質(聚乙二醇4000和聚乙二醇6000配比為1:2混合物)；將所述基質加熱至熔融，邊攪拌邊加入荔枝核提取物，混勻，將所得混合液加入滴丸機貯液罐，保溫75℃，通過滴頭勻速滴入裝有冷卻劑的收集器中，所述冷卻劑的保溫溫度為5℃，滴制完后，取出藥丸，篩選出合格的藥丸，除去表面冷卻劑，真空室溫干燥過夜，即得荔枝核滴丸。為保證藥物的安全、有效、穩定，有必要對滴丸中原花青素含量進行監控。

目前，現有文獻對荔枝核原花青素成分的含量測定普遍是采用“鐵鹽催化比色法”，原理是利用酚羥基特點，與鐵離子螯合產生顏色而進行，因為較多的中藥成分均具有該種酚羥基，因此這種方法專屬性較差。因此，建立一種能準確檢測荔枝核滴丸原花青素含量的質量檢測方法具有現實的意義。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明的目的在于提供一種專屬性好、有效、穩定、能夠迅速、靈敏地測定荔枝核滴丸中原花青素含量的方法，從而有效檢測荔枝核滴丸的質量。

因此，本發明提供了一種荔枝核滴丸質量檢測方法，包括以下步驟：

1)取原花青素對照品，加入甲醇溶解、定容、搖勻，制成每毫升含原花青素1.15mg的對照品溶液；

2)取荔枝核滴丸，研碎，精密稱定0.5g，加入40mL體積濃度為70％的丙酮進行超聲提取30min，濾過，殘渣用體積濃度為70％的丙酮洗滌，合并濾液進行水浴加熱揮干丙酮，殘渣用甲醇溶解并轉移至25mL量瓶中，并以甲醇稀釋至刻度，搖勻，用0.2μm微孔濾膜濾過，將續濾液作為供試品溶液；

3)精密吸取步驟1)的對照品溶液0.5、1、3、5、10、20μL進樣，測定峰面積；得標準曲線方程：A＝1012.25C-567.89，R²＝0.9986；精密吸取步驟2)的供試品溶液10μL，進樣，測定峰面積，代入上述標準曲線方程計算得到荔枝核滴丸中的原花青素含量。

根據本發明的方法，優選地，所使用的色譜柱為CAPCELL?PAK?C₁₈UG120S3，規格為4.6mm×100mm,5μm；流動相為乙腈-0.1％磷酸(10:90)，流速為1.0mL/min，柱溫為30℃；檢測波長為280nm，理論塔板數按原花青素計算至少為2000。

與現有技術中的傳統檢測方法相比，本發明提供了一種新的荔枝核滴丸質量檢測方法，該方法基于高效液相色譜，步驟設計合理，通過適當的預處理，能夠有效去除荔枝核滴丸中的雜質，使樣品中的原花青素提取得更完全，同時采用了全新的固定相和流動相，結合合理的流速、柱溫、波長，使得整個方法的專屬性更好、更有效、更穩定、能夠更迅速、靈敏地測定荔枝核滴丸中的原花青素含量，從而有效地檢測荔枝核滴丸的質量，保證用藥安全。

具體實施方式

下面根據具體實施例對本發明的方法作進一步的詳述，但本發明并不限于以下實施例。值得注意的是，本發明方法中的荔枝核滴丸按照中國發明專利申請CN102836265記載的方法制得；原花青素對照品等材料可經由商業渠道獲得(例如本實施例來自上海同田生物技術股份有限公司)，所用到的乙腈、磷酸和甲醇等均為色譜純。

實施例1