[發明專利]一種短蛸胃腸道產蛋白酶菌株及其應用

有效

• 申請號: 201410195252.4
• 申請日: 2014-05-09
• 公開（公告）號: CN103966132A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 金玉蘭;王玉榮;肖琳
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/52;C11D3/38;C12R1/63
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，尤其涉及一種短蛸胃腸道產蛋白酶菌株及其應用。

背景技術

蛋白酶是作用于蛋白質或多肽催化肽鍵水解的水解酶類，是最重要的三大工業用酶之一，具有催化能力高、反應條件溫和、底物專一性等特點。蛋白酶的銷售額約占全球酶制劑市場的60％，對經濟的發展起著重要的作用。蛋白酶廣泛分布于動物、植物、微生物中。通過微生物發酵產生的蛋白酶我們把它稱之為微生物蛋白酶，與菠蘿、木瓜、豬胰臟等傳統的動植物資源相比，微生物蛋白酶資源具有無法比擬的優勢。隨著基因工程的加入、發酵技術的發展、酶制劑的廣泛應用及新型發酵設備的發明，微生物成為工業用蛋白酶的主要來源。蛋白酶的用途非常廣泛，最大的用途是洗滌劑，其次用于飼料、食品工業、釀酒釀造，以及制革工業和醫藥。全世界洗滌劑的年產量已達1.3億噸，在歐洲加酶洗衣粉的比例達到80％左右，美國45％的洗滌劑加酶，日本加酶的洗衣粉比例也達60％以上，全世界堿性蛋白酶的銷售額約占世界酶制劑市場的25％。

我國是世界上最大的養殖生產國、飼料原料(特別是蛋白質原料)需求大國之一，但是我國飼料工業生產中蛋白質飼料資源的嚴重不足，魚粉等高品質動物蛋白原料主要依賴國際進口，而目前全球性魚類資源的日趨減少直接導致魚粉價格上漲，動物蛋白價格高漲使得人們將視線逐漸轉向了植物蛋白。豆粕作為一種質量穩定的植物蛋白原料，一直是餅粕消費的主體，加之動物性蛋白資源日益短缺，價格居高不下，促使豆粕植物性蛋白原料需求的擴大。但由于豆粕中抗營養因子的存在以及其適口性差等問題限制了豆粕的應用價值。

目前，我國的蛋白酶研究還存在蛋白酶種類單一、微生物來源較少等問題，因此尋找和開發新的微生物蛋白酶來源是目前科研的重點。

發明內容

本發明的目的在于提供一種短蛸胃腸道產蛋白酶菌株及其應用，旨在解決我國蛋白酶研究還存在蛋白酶種類單一、微生物來源較少等問題。

本發明是這樣實現的，一種短蛸胃腸道產蛋白酶菌株(Vibrio sp.S-3)，于2013年9月30日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號為CGMCC No.8299，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所。該短蛸胃腸道產蛋白酶菌株的16S rRNA序列如序列表中SEQ ID NO：1所示，該菌株為革蘭氏陰性菌，菌落為乳白色、圓形、平整、邊緣整齊濕潤的光滑小菌落。

本發明進一步提供上述短蛸胃腸道產蛋白酶菌株在生產洗滌劑添加劑方面的應用。

本發明進一步提供上述短蛸胃腸道產蛋白酶菌株在生產酶解豆粕的蛋白酶方面的應用。

相比于現有技術的缺點和不足，本發明具有以下有益效果：本發明從短蛸胃腸道內篩選了一種產蛋白酶菌株Vibrio sp.S-3，高效地產生蛋白酶，用于洗滌劑添加劑，酶解豆粕，提高了資源利用率，降低了生產成本。

附圖說明

圖1為本發明實施例1中各菌株發酵液的蛋白酶活力圖；

圖2為本發明實施例1中Vibrio sp.S-3系統發育樹；

圖3為本發明實施例2中不同碳源對Vibrio sp.S-3菌株產蛋白酶的影響圖；

圖4為本發明實施例2中不同氮源對Vibrio sp.S-3菌株產蛋白酶的影響圖；

圖5為培養基起始pH值對Vibrio sp.S-3菌株產蛋白酶的影響圖；

圖6為本發明實施例2中培養溫度對Vibrio sp.S-3菌株產蛋白酶活力的影響圖；

圖7為本發明實施例2中培養時間對Vibrio sp.S-3菌株產蛋白酶活力的影響圖。

具體實施方式

以往人們多從土壤、溫泉水中采集樣本篩選產蛋白酶微生物，近年來，人們逐漸將開發利用的眼光投向海洋。海洋特有的環境造就了海洋生物的多樣性與獨特性，低溫、高壓、高鹽量使得海洋生物中一些酶、激素以及其他代謝產物有著極高的活性，海洋生物也將成為各國學者研究的主要對象。章魚屬軟體動物門(Mollusca)、頭足綱(Cephalopoda)、八腕目(Octopoda)、章魚科(octopodidae)，學名“蛸”。其體短，卵圓形，無鰭，頭上生八腕，腕長短不等，腕間有膜相連，腕上吸盤無柄。根據腕的長短，章魚主要分為8種，分別為短蛸、卵蛸、雙點蛸、真蛸、環蛸、長蛸、紡錘蛸、嘉庚蛸。本發明所選用的章魚為短蛸(Octopus ocellatus)，屬軟體動物門、頭足綱、八腕目、章魚科、蛸屬，主要棲居于溫帶偏北海域，是我國北方沿岸蛸類中最重要的經濟種。