[發(fā)明專(zhuān)利]新酚嗪類(lèi)抗腫瘤抗生素及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410195152.1
• 申請(qǐng)日: 2014-05-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103993050A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李一青;戎賀;趙立興;徐麗華
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 云南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P17/18
• 分類(lèi)號(hào): C12P17/18;C07D498/22;A61P35/00;C12R1/465
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.?一種新酚嗪類(lèi)抗腫瘤抗生素的制備方法，其特征是該方法包括如下步驟?:

(l)?菌種液體種子培養(yǎng)?：

①液體種子培養(yǎng)基的制備?:取酵母膏2.0~6.0g、葡萄糖2.0~6.0g、麥芽膏3.0~7.0g、復(fù)合維生素2.5~4.5ml、加水至1000ml，pH?7.2，120°C滅菌30min?；??②發(fā)酵?:將菌株YIM?R4接種到滅菌后的培養(yǎng)基中，28°C下于轉(zhuǎn)速為190~250轉(zhuǎn)／分鐘的搖床上搖瓶發(fā)酵2天?；

(2)?菌種發(fā)酵培養(yǎng)?：

①發(fā)酵培養(yǎng)基的制備?:取淀粉20.0~30.0g、牛肉膏1.0~5.0g、葡萄糖0.5~1.5g、酵母膏3.0~7.0g、蛋白胨1.0~5.0g、CaCO₃?2.0~6.0g、加水至1000ml，pH?7.0，120°C滅菌30min?；②發(fā)酵?：將上述方法(l)中得到的菌株YIM?R4種子液加到滅菌后的發(fā)酵培養(yǎng)基中，加菌種量為發(fā)酵培養(yǎng)基重量的10?%，28°C下于轉(zhuǎn)速為190~250轉(zhuǎn)／分鐘的搖床上搖瓶發(fā)酵6~8天?；

(3)?發(fā)酵液處理?：

①發(fā)酵液經(jīng)2500~3500轉(zhuǎn)／分鐘離心，離心時(shí)間為15~25分鐘?；②以等體積乙酸乙醋萃取發(fā)酵上清液3~5次，回收乙酸乙醋，菌絲體用丙酮浸泡并超聲破碎，回收丙酮，合并二部分提取物，得到具有活性部位的棕褐色膏狀物?；③進(jìn)行硅膠柱層析，以三氯甲烷?：甲醇40?：1至1?：1梯度洗脫，收集含有該化合物的組分，回收溶劑，得到粗品一種抗腫瘤抗生素?；④將粗品一種抗腫瘤抗生素依次進(jìn)行甲醇凝膠及三氯甲烷?：甲醇30?：1硅膠柱層析，回收溶劑，得到一種抗腫瘤抗生素較純品?；⑤將一種抗腫瘤抗生素較純品進(jìn)行甲醇凝膠柱層析，回收溶劑，得到一種抗腫瘤抗生素純品，所述抗腫瘤抗生素的結(jié)構(gòu)為?：

。

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新酚嗪類(lèi)抗腫瘤抗生素的制備方法，其特征是所述的酵母膏為4.0g、葡萄糖為4.0g、麥芽膏為5.0g、復(fù)合維生素為3.5ml。

3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新酚嗪類(lèi)抗腫瘤抗生素的制備方法，其特征是所述的淀粉為24.0g、牛肉膏為3.0g、葡萄糖為1.0g、酵母膏為5.0g、蛋白胨為3.0g、CaCO₃為4.0g。

4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新酚嗪類(lèi)抗腫瘤抗生素的制備方法，其特征是所述的搖床轉(zhuǎn)數(shù)為220轉(zhuǎn)／分鐘，所述發(fā)酵時(shí)間為7天。