[發明專利]一種穩定的同型半胱氨酸檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201410195095.7
• 申請日: 2014-05-09
• 公開（公告）號: CN103954774A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 譚柏清;羅維曉;甘宜梧;王綺
• 申請（專利權）人: 山東博科生物產業有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/535
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 張世靜

技術領域

本發明涉及一種穩定的同型半胱氨酸檢測試劑盒，屬于臨床體外檢測技術領域。

背景技術

同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)又稱高半胱氨酸，是一種與半胱氨酸同系的、含硫含氨酸分解代謝的重要中間產物，不參與體蛋白質合成。血漿Hcy是一個總稱，指血漿中所有形式的Hcy，包括還原型Hey，雙硫Hcy，混合雙硫半胱氨酸一Hcy和混合雙硫蛋白質一Hey：正常情況下游離Hey很少，主要以蛋白質形式存在。很多因素如遺傳、營養、腎功能不全、藥物、激素等因素均可能影響體內同型半胱氨酸的代謝，造成高Hey血癥。大量研究證明，高Hey是引起心、腦、外周血管病的一個新的、重要的獨立性危險因素，Hcy和高血壓之間有一定的相關性，提示高Hcy水平可能是高血壓的一個相對危險因素。有效控制Hcy水平對高血壓病例意義重大。

當前同型半胱氨酸的檢測方法多種多樣，其中常見的方法有HPLc法、HPLC法、mA法??、EUSA法和循環酶法等，其中HPLc法是經典的方法，循環酶法是最近推出的新的檢測方法，HPLC法和mA法都具有較高的靈敏度和精密度，是應用最廣泛的兩種方法。而mA法操作更加簡單速度也較快，但兩者成本相對較高。EUSA法和循環酶法操作較簡單并且成本也較低，而循環酶法在全自動生化分析儀上用，具操作簡單和更快的檢測速度，并有著較好的靈敏度和精密度，具有更加廣泛的應用前景。樣本中的氧化型同型半胱氨酸（Hcy)經還?原劑還原后，在同型半胱氨酸轉甲基酶（HcyMetase)的催化作用下，?與S-腺苷-L-蛋氨酸（AdoMet)反應，生成S-腺苷-L-同型半胱氨酸(AdoHcy)和L-蛋氨酸（Met)。?S-腺苷-L-同型半胱氨酸在腺香同型?半胱氨酸酶（AdoHcyase)的作用下水解為L-同型半胱氨酸和腺苷(Ado?)。反應生成的蛋氨酸與試劑中的三磷酸腺苷（ATP?)在蛋氨酸?轉腺苷酶（MAT)的作用下生成S-腺華-L-蛋氨酸（AdoMet)。樣本?中的L-同型半胱氨酸反復循環反應，不斷產生腺苷，腺普的生成速?率與樣本中同型半胱氨酸的含量成正比，通過測定腺苦的生成速率，?就可以達到測定體液樣本中同型半胱氨酸含量的目的。

現在市面上生產的同型半胱氨酸檢測試劑為了提高其穩定性，多將其檢測試劑設置為四試劑或者三試劑，甚至更多的試劑，當遇到只能做雙試劑的生化分析儀器的時候，需要現場手工將試劑按比例混勻，并盡快用完，這樣既增加了操作的繁瑣性，又不利于試劑的長期保存，非常不利于檢測試劑在全自動生化儀器上的推廣。???????????????????????????????????????????????????????????????????????

發明內容

本發明的目的在于提供一種穩定性好的同型半胱氨酸檢測試劑。

本發明的技術方案如下：一種穩定的同型半胱氨酸檢測試劑盒，包括體積比為240:65的試劑1和試劑2，試劑1和試劑2的組成及含量如下：

試劑1（R1）??????????

TRIS(三羥甲基氨基甲烷)緩沖液，???????????????????PH?7.1?????

EDTA.2Na（乙二胺四乙酸二鈉）?????????????????????0.1~20mM

ATP?????????????????????????????????????????????????????????????0.1~90mM

S-腺苷甲硫氨酸（SAM）?????????????????????????????0.1~1mM

NADH?????????????????????????????????????????????????????0.3~1mM

三（2羧乙基）膦氯化氫（TCEP）???????????????????0.5~1mM

α－酮戊二酸????????????????????????????????????????5~10mM

牛血清白蛋白???????????????????????????????????????????0.1~1g/L

疊氮鈉????????????????????????????????????????????????????0.1?~1?g/L?????；?

試劑2（R2）

TRIS(三羥甲基氨基甲烷)?緩沖液，?????????????????????Ph7.8?????