[發(fā)明專利]小麥品種中國(guó)春的Waxy蛋白亞基和其編碼基因及應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410193398.5
• 申請(qǐng)日: 2014-05-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104031130A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳其皎;高翔;孟敏;董劍;趙萬(wàn)春
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/415
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/415;C12N15/29;C12N15/10;C12N15/70;A21D2/26
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11385
• 代理人: 董芙蓉

1.小麥品種中國(guó)春的Waxy蛋白亞基，其特征在于氨基酸序列為SEQ?ID?NO1；其編碼基因的核苷酸序列為SEQ?ID?NO2。

2.小麥品種中國(guó)春的Waxy蛋白亞基，其特征在于氨基酸序列為SEQ?ID?NO3；其編碼基因的核苷酸序列為SEQ?ID?NO4。

3.小麥品種中國(guó)春的Waxy蛋白亞基，其特征在于氨基酸序列為SEQ?ID?NO5；其編碼基因的核苷酸序列為SEQ?ID?NO6。

4.小麥品種中國(guó)春Waxy蛋白亞基編碼基因的克隆方法，其特征在于小麥品種中國(guó)春小麥的cDNA為模版，采用下述引物進(jìn)行PCR克隆：

上游引物5’-ATGGCGGCTCTGGTCACGT-3’；

下游引物5’-TCAGGGAGCGGCGACGTT-3’。

5.小麥品種中國(guó)春Waxy蛋白亞基的表達(dá)方法，其特征在于包括構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒和重組質(zhì)粒進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)的步驟。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的表達(dá)方法，其特征在于構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒包括如下步驟：將PCR克隆得到的產(chǎn)物回收的目的片段用表達(dá)載體連接，然后連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入感受態(tài)細(xì)胞，在涂有氨芐青霉素的LB平板上篩選陽(yáng)性克隆。

7.根據(jù)權(quán)利要求7所述的表達(dá)方法，其特征在于所述表達(dá)載體為pEASY-E1，所述感受態(tài)細(xì)胞為大腸桿菌DH5α。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的表達(dá)方法，其特征在于重組質(zhì)粒的誘導(dǎo)表達(dá)包括如下步驟：將篩選出的陽(yáng)性克隆質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到表達(dá)宿主細(xì)胞，篩選高效表達(dá)Waxy蛋白亞基的菌株，擴(kuò)大培養(yǎng)細(xì)胞及誘導(dǎo)表達(dá)，通過(guò)純化獲得重組蛋白。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的表達(dá)方法，其特征在于所述表達(dá)宿主細(xì)胞為E.coli?Rosettagami?B(DE3)。

10.小麥品種中國(guó)春的Waxy蛋白亞基在提高面粉品質(zhì)中的應(yīng)用。