[發(fā)明專利]microRNA及其在制備活動性結核病檢測試劑中的應用

有效

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• 申請日: 2014-05-08
• 公開（公告）號: CN104017806B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發(fā)明（設計）人: 張文宏;吳晶;陳嘉臻;王森
• 申請（專利權）人: 復旦大學;復旦大學附屬華山醫(yī)院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/68
• 代理公司: 上海申新律師事務所31272
• 代理人: 竺路玲

技術領域

本發(fā)明涉及生物治療領域，尤其涉及一種與結核感染相關的microRNA及其在制備活動性結核病檢測試劑中的應用。

背景技術

結核病仍然是威脅人類健康的主要傳染病之一，每年全世界依然有幾百萬的新發(fā)結核病例。我國在結核病的預防和控制上投入了大量人力物力，盡管我國廣泛接種卡介苗(BCG)，并依照WHO的標準來治療結核病患者，但每年死于結核的人數依然徘徊于主要傳染病的前三位。特別是近年來，隨著耐藥結核以及耐多藥結核菌株的流行，以及結核與艾滋合并感染的增多，使得結核問題變得更為復雜。持續(xù)升溫的結核問題使得發(fā)達國家也加強了結核基礎研究和應用研究方面的投入，包括臨床快速診斷，改良或研發(fā)新疫苗，研發(fā)新型抗結核藥物，以及研究結核桿菌同宿主免疫系統(tǒng)之間的相互作用機制。

結核感染機體后，免疫反應中的調節(jié)子，比如細胞因子，細胞表面受體等等，一直是研究的重點。關注這些免疫調節(jié)子，不僅可以了解結核感染的具體致病機制，更可以利用相關因子作為診斷或治療的靶標，來開發(fā)新型診斷技術或治療手段。比如IFN-γ主要由CD4和CD8T細胞分泌，是指導TH1型細胞免疫的主要細胞因子。目前基于IFN-γ釋放試驗診斷結核感染的方法，就是利用血液中特異性T淋巴細胞來識別TB抗原，釋放IFN-γ的原理。在已有研究中發(fā)現(xiàn)，潛伏結核感染者血里IFN-γ含量高于活動性結核病人，另外一些炎癥因子，比如TNF-α，IL-6，IP-10和MIP-1等等，也隨著TB發(fā)病呈現(xiàn)不同的表達譜。而另一些特征性因子，比如細胞表面受體TLR2，TLR4等的表達也與結核發(fā)病相關。

此外，結核病發(fā)生與否，主要受兩種因素的影響，一為感染菌量及結核桿菌毒力的大小，另一為機體免疫抵抗力的高低。所以老年人與兒童等機體免疫抵抗力較低的人群較容易發(fā)生結核病。這與活動性結核患者體內調控系統(tǒng)可能存在著失調的情況有關，這其中可能包含一類特殊的調節(jié)子，microRNA，在結核感染中表達情況與調節(jié)作用都并不清楚，尚在研究中。

MicroRNA是一種內源非編碼的小RNA，在生物體內起著重要調控作用。它主要在轉錄后水平通過降解mRNA或抑制翻譯的方式，抑制靶基因的表達。這種調控作用貫穿于細胞生長，分化，信號轉導的各個環(huán)節(jié)。自microRNA被發(fā)現(xiàn)以來，研究日新月異，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)microRNA在人類各種疾病中都具有特征表達譜，對于發(fā)病或疾病的進程具有預示作用。

現(xiàn)有技術中，已經可以通過建立microRNA特征表達譜，來揭示microRNA與相關疾病之間的聯(lián)系；更多的研究者希望能找到疾病特征的microRNA，用來為疾病診斷服務；還有研究者把特殊的microRNA作為治療的靶點，進行藥物開發(fā)。

現(xiàn)有的采用microRNA對疾病進行診斷或治療的技術有：如由丹麥制藥公司Santaris Pharma開發(fā)的LNA-antimiRTM-122已經進入了臨床試驗，是世界上首個在人體中試驗的micro RNA藥物；又如Hoekstra等找到miR-135a在冠狀動脈疾病(CAD)患者中上調，而miR-147卻在CAD患者中明顯下調表達。MiR-146a，miR-155，miR-132和miR-16被報道在風濕病人PBMC中呈不同程度的上調表達。Dai等發(fā)現(xiàn)有16個microRNA是在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的PBMC中差異表達。Voellenkle等對缺血性慢性心衰患者(ICM)、非缺血性心肌擴張型心衰患者(NIDCM)以及對照組PBMC中microRNA表達進行分析，發(fā)現(xiàn)miR-107，miR-139和miR-142-5p在兩組患者中都是下調表達，而miR-142-3p和miR-29b僅在NIDCM患者中上調，同時miR-125b和miR-497僅在ICM患者中下調。

由于microRNA檢測技術復雜，不同的microRNA對疾病的表達差異較大，因此，亟待對與結核感染相關的microRNA進一步的研究。

發(fā)明內容

本發(fā)明旨在對與結核感染相關的microRNA進一步的研究，并提供了一種與結核感染有關的microRNA及其應用。

本發(fā)明的第一方面提供了一種microRNA，所述的microRNA中包括序列為SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、以及SEQ ID No.4的microRNA中的一種或幾種。

所述的microRNA為與結核感染有關的microRNA。