[發明專利]一種適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法

有效

• 申請號: 201410192731.0
• 申請日: 2014-05-09
• 公開（公告）號: CN103965096A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 唐方華;黃華學;劉永勝
• 申請（專利權）人: 湖南華誠生物資源有限公司
• 主分類號: C07D211/46
• 分類號: C07D211/46
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所 43205
• 代理人: 黃純能;寧星耀

1. 一種適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）原料前處理：將干燥原料桑葉粉碎至20-40目，得粉料；

（2）酶解：向步驟（1）所得的粉料中加入干燥原料重量6-10倍的水，升溫至40-50℃，然后加入干燥原料重量的0.05-0.20%的組合酶，酶解3-5h，過濾，得濾渣；

（3）連續組合提?。簩⒉襟E（2）所得的濾渣使用3-4個提取裝置連續組合提取，每個提取裝置中的濾渣提取3-4次，每次提取所用溶劑為干燥原料重量6-9倍的親水溶劑，提取溫度為70-90℃，提取時間為1.8-2.2h，提取后，合并提取液，過濾；

所述親水溶劑為含酸性溶液的親水溶劑，所述酸性溶液的體積分數為0.2-0.4%；

（4）醇沉、離心：將經步驟（3）過濾后的提取液進行減壓濃縮，濃縮至原體積的1/3-1/2，冷卻至20-30℃，用質量分數為1-2%的堿液調節pH至8-9，然后加入相當于調節pH值后濃縮液重量3-4倍的醇溶液，攪拌10-15min后，靜置3-4h，管式離心，離心速率為10000-14000r/min，得離心液；

（5）膜濾：將步驟（4）所得的離心液常溫下在壓力為25-35bar條件下，使用孔徑為5-10kDa的有機超濾膜進行超濾處理，得超濾透過液，然后常溫下在壓力為0.5-1.5MPa條件下，使用孔徑為300-800Da的納濾膜進行納濾處理，得納濾透過液；

（6）濃縮：將步驟（5）所得的納濾透過液進行減壓濃縮，濃縮至原體積的1/4-1/6，得濃縮液；

（7）干燥：將步驟（6）所得的濃縮液進行干燥后，即得產品。

2.根據權利要求1所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（2）中，加入的組合酶為纖維素酶與果膠酶，其中纖維素酶:果膠酶=2-4:1，w/w。

3.根據權利要求1或2所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（3）中，所述親水溶劑為甲醇或乙醇，所述酸性溶液為質量分數37.5%的鹽酸、質量分數98%的硫酸或甲酸。

4.根據權利要求1或2所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（4）中，所述減壓濃縮的溫度為60-80℃，真空度為-0.08～-0.04MPa。

5.根據權利要求1或2所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（4）中，所述堿液為氫氧化鈉溶液、碳酸鈉溶液或碳酸氫鈉溶液。

6.根據權利要求1或2所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（4）中，所述醇溶液為體積分數80-95%的乙醇溶液。

7.根據權利要求1或2所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（5）中，所用超濾膜的材質為聚碳酸酯、聚砜或聚丙烯腈；所用納濾膜的材質為CA膜、CTA膜或芳族聚酰胺復合膜。

8.根據權利要求1或2所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（6）中，所述減壓濃縮的溫度為70-80℃，真空度為-0.08～-0.06MPa。

9.根據權利要求1或2所述的適用于工業生產的1-脫氧野尻霉素的制備方法，其特征在于，步驟（7）中，所述干燥為真空干燥或噴霧干燥。