[發明專利]一種煙花苷的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201410191984.6
• 申請日: 2014-05-08
• 公開（公告）號: CN103923138A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 吳孔松;吳朝陽;吳安明
• 申請（專利權）人: 江西天施康中藥股份有限公司
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08;G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及中藥領域，特別涉及一種煙花苷的制備方法及其應用。

背景技術

收載于2010年版《中華人民共和國藥典》的腸炎寧糖漿和腸炎寧片具有清熱利濕、行氣的功效，用于急、慢性胃腸炎，腹瀉，細菌性痢疾，小兒消化不良等，臨床應用廣泛、療效確切。近幾年，國家食品藥品監督管理局又新批準了腸炎寧丸、腸炎寧顆粒、腸炎寧膠囊、腸炎寧咀嚼片等劑型。目前已有報道中，腸炎寧制劑質量檢測指標成分為東莨菪內酯、沒食子酸和雞屎藤苷甲酯，而腸炎寧制劑中含量較高的黃酮類成分沒有明確的檢測指標成分。申請人采用HPLC法，并以槲皮素、山奈酚和蘆丁等3種常見的黃酮類成分對照品作為對照，對腸炎寧制劑進行了分析，發現由于藥材是采用水提，所以腸炎寧制劑中槲皮素和山奈酚的含量較低；腸炎寧制劑色譜圖中與蘆丁對照品色譜峰保留時間相同的地方有色譜峰，但分離度較差，而且峰純度檢測顯示該色譜峰中包含了其它成分。

發明內容

本發明的目的在于提供一種煙花苷的制備方法，本發明制備得到的煙花苷可作為腸炎寧制劑含量測定用的對照品。

本發明提供的煙花苷的制備方法，包括如下步驟：

(1)取含煙花苷的藥材或提取物用含水有機溶劑提取，得提取液；

(2)提取液經濃縮、過濾，得濾液；

(3)濾液經聚酰胺柱吸附，水洗棄去，30％～100％甲醇或乙醇溶液洗脫，得洗脫液；

(4)洗脫液經濃縮，用正丁醇萃取；或先用極性小的有機溶劑萃取，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液；

(5)正丁醇萃取液經濃縮，用堿水萃取，收集水層部分，調PH值至3-6，濃縮，經聚酰胺柱吸附，水洗棄去，30％～100％甲醇或乙醇溶液洗脫，洗脫液得到的提取物再經自制C18柱和/或制備HPLC分離，即得。

本發明優選的煙花苷的制備方法，包括如下步驟：

(1)取含煙花苷的藥材或提取物用30％～100％甲醇或乙醇溶液提取，得提取液；

(2)提取液經濃縮、過濾，得濾液；

(3)濾液經聚酰胺柱吸附，水洗棄去，30％～50％甲醇或乙醇溶液洗脫，得洗脫液；

(4)洗脫液經濃縮，先用乙酸乙酯萃取棄去，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液；

(5)正丁醇萃取液經濃縮，用堿水萃取，收集水層部分，調PH值至4-5，濃縮，濃縮液經聚酰胺柱吸附，水洗棄去，30％～50％甲醇或乙醇溶液洗脫，洗脫液得到的提取物再經自制C18柱和/或制備HPLC，以體積比例為20:80～40:60的甲醇-水混合溶液洗脫，即得。

本發明更優選的煙花苷的制備方法，包括如下步驟：

(1)取含煙花苷的藥材或提取物，用30％～75％乙醇溶液提取，得提取液；

(2)提取液經濃縮、過濾，得濾液；

(3)濾液經聚酰胺柱吸附，水洗棄去，30％乙醇溶液洗脫，得洗脫液；

(4)洗脫液經濃縮，先用乙酸乙酯萃取棄去，再用正丁醇萃取，得正丁醇萃取液；

(5)正丁醇萃取液經濃縮，用5％碳酸鈉溶液萃取，收集水層部分，調PH值至4-5，濃縮，經聚酰胺柱吸附，水洗棄去，30％乙醇溶液洗脫，洗脫液得到的提取物再經自制C18柱和/或制備HPLC，以體積比例為20:80～40:60甲醇-水混合溶液洗脫，即得。

本發明提供的煙花苷可作為腸炎寧制劑含量測定用的對照品。

本發明所述的腸炎寧制劑為腸炎寧口服液、腸炎寧糖漿、腸炎寧膠囊、腸炎寧顆粒、腸炎寧片、腸炎寧咀嚼片或腸炎寧丸中的任意一種。

本發明創新之處在于：通過HPLC法對腸炎寧制劑進行色譜分析，并利用光譜分析和峰純度檢測技術篩選出分離度和峰純度都較好的黃酮類成分色譜峰，然后對其進行分離、鑒定，最終分離鑒定得到其中一個黃酮類成分煙花苷。通過對煙花苷含量測定方法學考察表明，采用HPLC法測定腸炎寧制劑中的煙花苷簡便、快速、準確、重復性好，有助于更好的控制腸炎寧制劑的質量。本發明制備得到的煙花苷經標定純度大于98％，可作為腸炎寧制劑含量測定用的對照品。

下面將通過一些實驗例對本發明作進一步說明。

實驗例1腸炎寧制劑黃酮類成分對照品的研究

1、腸炎寧制劑中待分離目標成分的篩選

(1)色譜條件：DikmaC₁₈色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動相：0.3％冰醋酸水溶液—乙腈(梯度洗脫，0min比例為85:15，60min比例為65:35)；檢測波長為350nm。