[發明專利]精品硫酸軟骨素A和C和制備精品硫酸軟骨素A和C的方法有效
| 申請號: | 201410190564.6 | 申請日: | 2014-05-07 |
| 公開(公告)號: | CN104140472B | 公開(公告)日: | 2017-11-28 |
| 發明(設計)人: | 邢新會;吳敬君;張翀 | 申請(專利權)人: | 清華大學 |
| 主分類號: | C08B37/08 | 分類號: | C08B37/08 |
| 代理公司: | 北京坤瑞律師事務所11494 | 代理人: | 閆桑田 |
| 地址: | 10008*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 精品 硫酸 軟骨素 制備 方法 | ||
1.一種制備精品硫酸軟骨素A和C的方法,其包括:
向含硫酸軟骨素A和C成分的硫酸軟骨素混合物的溶液中加入硫酸軟骨素酶B,使其與含硫酸軟骨素A和C的硫酸軟骨素混合物中的硫酸皮膚素成分反應。
2.根據權利要求1所述的方法,其還包括:
通過分離方法分離除去混合物中的經酶分解后得到的低分子量的硫酸皮膚素。
3.根據權利要求2所述的方法,其中所述低分子量的硫酸皮膚素為分子量在2000道爾頓以下的經降解的硫酸皮膚素。
4.根據權利要求1所述的方法,其中,所述硫酸軟骨素酶B是與MBP融合的硫酸軟骨素酶B,即MBP-ChonB。
5.根據權利要求1所述的方法,其中包括進一步除去硫酸軟骨素酶B,其中,通過將加入了硫酸軟骨素酶B的溶液加熱至70℃以上,以停止硫酸軟骨素酶B與所述硫酸皮膚素成分的反應,然后通過離心分離從所述溶液中除去加熱后的硫酸軟骨素酶B。
6.根據權利要求1所述的方法,其中包括進一步除去硫酸軟骨素酶B,其中,通過將加入了硫酸軟骨素酶B的溶液加熱至80℃以上以停止硫酸軟骨素酶B與所述硫酸皮膚素成分的反應,然后通過離心分離從所述溶液中除去加熱后的硫酸軟骨素酶B。
7.根據權利要求2所述的方法,其中,所述分離方法為醇沉淀分離。
8.根據權利要求2所述的方法,其中,所述分離方法為超濾膜分離。
9.根據權利要求7所述的方法,其中,所述醇沉淀分離是一級乙醇沉淀分離。
10.根據權利要求1所述的方法,其中,硫酸軟骨素酶B與硫酸皮膚素的反應在20~40℃的條件下進行,以及在pH為6.5-9的條件下進行。
11.根據權利要求1所述的方法,其中,硫酸軟骨素酶B與硫酸皮膚素的反應在25~35℃的條件下進行,以及在pH為7~8.5的條件下進行。
12.根據權利要求1所述的方法,所述硫酸軟骨素酶B和所述硫酸軟骨素混合物的比例為:100IU~10000IU硫酸軟骨素酶B/kg硫酸軟骨素混合物。
13.根據權利要求1所述的方法,所述硫酸軟骨素酶B和所述硫酸軟骨素混合物的比例為:500IU~5000IU硫酸軟骨素酶B/kg硫酸軟骨素混合物。
14.根據權利要求1所述的方法,所述硫酸軟骨素酶B和所述硫酸軟骨素混合物的比例為:1000IU-5000IU硫酸軟骨素酶B/kg硫酸軟骨素混合物。
15.根據權利要求1所述的方法,其中,所述含硫酸軟骨素A和C的硫酸軟骨素混合物來自豬、牛、羊、驢、雞的軟骨;來自鱘魚、鯊魚、魷魚、魟、鰩、鰻、鱔魚的軟骨;以及來自貝類、海參、蚯蚓、鹿茸和蛋殼膜。
16.根據權利要求1所述的方法,其中,所述硫酸軟骨素混合物來自豬、牛、羊的軟骨。
17.根據權利要求1所述的方法,其中,所述硫酸軟骨素混合物溶液的濃度為1g/L~500g/L。
18.根據權利要求1所述的方法,其中,所述硫酸軟骨素混合物溶液的濃度為1g/L~100g/L。
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