[發(fā)明專(zhuān)利]一種小麥抗白粉病基因Stpk-V的標(biāo)記引物及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410189567.8
• 申請(qǐng)日: 2014-05-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105087760B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊學(xué)明;呂遠(yuǎn)大;周淼平;姚金保;楊丹;馬鴻翔
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6895
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所32237
• 代理人: 孫忠浩

1.一種小麥抗白粉病基因Stpk-V的標(biāo)記引物，其特征在于，小麥抗白粉病基因Stpk-V的標(biāo)記引物InDel_w190，由核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物和如SEQ ID NO：2所示的下游引物組成。

2.如權(quán)利要求1所述小麥抗白粉病基因Stpk-V的標(biāo)記引物在抗小麥白粉病Stpk-V基因檢測(cè)中的應(yīng)用；

所述應(yīng)用是指，以被檢測(cè)小麥植株的DNA為模板，以SEQ ID NO:1和SEQ ID NO：2為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè)是否含有大小為190bp的特異性條帶，若存在，則具有小麥抗白粉病基因Stpk-V，為抗白小麥粉病植株。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增為：

PCR反應(yīng)體系為25μL：DNA模板40 ng，引物SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2各5 pmol，1×PCR buffer，1.5 mM MgCl₂，0.2 mM dNTP，Taq DNA polymerase 1U；

PCR反應(yīng)循環(huán)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性3min，94℃變性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，35個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min；

所述電泳檢測(cè)檢測(cè)是指：1% Metaphor agarose膠電泳后檢測(cè)，電泳電壓100v，電泳時(shí)間2h。