[發明專利]一種棒狀鏈霉菌及在生產黑色素中的應用方法

有效

• 申請號: 201410186145.5
• 申請日: 2014-05-05
• 公開（公告）號: CN104212737B
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 劉曉俠;王玉潔;孫詩清;尤忠毓;徐微
• 申請（專利權）人: 嘉興學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/04;C12R1/465
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法，其特征在于，該棒狀鏈霉菌的菌株保藏編號為CGMCC No.8934；該棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法包括以下步驟：

步驟一，冷凍保存的棒狀鏈霉菌在高氏合成一號培養基上先進行菌種活化，高氏合成一號培養基 ：可溶性淀粉2g，KNO₃ 0.1g，K₂HPO₄ 0.05g，NaCl 0.05g，MgSO₄·7H₂O 0.05g，FeSO₄·7H₂O 0.01g，pH7.2-7.4；活化條件為：溫度為37℃，時間為48h；挑取活化平板上的單個菌落接種于種子培養液中，進行增殖培養；

步驟二，將種子液轉接到發酵培養基中進行發酵培養，發酵培養基g/L包括：麥芽糖1g/L，牛肉膏5g/L，氯化鈉5g/L，氯化鈣0.1g/L，L-酪氨酸2g/L，pH7.0；獲得發酵液；發酵培養的條件為：溫度為25～30℃，時間為6～10天；發酵培養為搖床培養，轉速為180r/min～220r/min；

步驟三，從發酵液中分離、干燥得到黑色素制品；將發酵液離心取上清，濃縮上清并調節pH為1～2，靜置一天后離心，取沉淀即為黑色素粗品；將黑色素粗品置于5mol/L～7mol/L的鹽酸溶液中浸泡4h～5h后，依次用無水乙醇和丙酮洗滌，常溫烘干至恒重，獲得黑色素純品。

2.如權利要求1所述的棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法，其特征在于，在步驟一中，增殖培養的條件為：溫度為30～40℃，時間為12～36h；增殖培養為搖床培養，轉速為150r/min～200r/min。

3.如權利要求1所述的棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法，其特征在于，在步驟一中，增殖培養的條件為：溫度為35～37℃，時間為24～28h；增殖培養為搖床培養，轉速為150r/min～200r/min。

4.如權利要求1所述的棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法，其特征在于，在步驟二中種子液的接種量為5～15％；發酵培養的溫度為28℃，時間7天；發酵培養為搖床培養，轉速為200r/min。

5.如權利要求1所述的棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法，其特征在于，在步驟二中種子液的接種量為10％；發酵培養的溫度為28℃，時間7天；發酵培養為搖床培養，轉速為200r/min。

6.如權利要求1所述的棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法，其特征在于，該棒狀鏈霉菌在生產黑色素中的應用方法的黑色素產量最高達0.85g/L。