[發(fā)明專利]藻藍蛋白β亞基基因的克隆表達無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410186005.8 | 申請日: | 2014-04-30 |
| 公開(公告)號: | CN103923938A | 公開(公告)日: | 2014-07-16 |
| 發(fā)明(設計)人: | 歐瑜;張靜 | 申請(專利權)人: | 中國藥科大學 |
| 主分類號: | C12N15/70 | 分類號: | C12N15/70;C12N15/66;C07K19/00;C07K14/795 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 211198 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 蛋白 基因 克隆 表達 | ||
1.一種藻藍蛋白β亞基基因在質粒載體上的克隆,其特征在于:質粒載體為pET-32a,酶切位點為BamH?I、HindIII。
2.根據(jù)權利要求1所述的重組質粒,其特征在于:重組質粒需轉化到感受態(tài)大腸桿菌BL21中以表達融合蛋白。
3.一種權利要求1所述的重組質粒的構建方法,其特征在于:PCR法擴增出藻藍蛋白β亞基基因,將擴增出的基因片段和質粒載體pET-32a同時用BamH?I、HindIII內切酶于37℃雙酶切1.5h,瓊脂糖凝膠電泳后切膠回收目的產物,16℃連接16h。
4.根據(jù)權利要求3所述,一種構建的工程菌表達的融合蛋白,其特征在于:融合蛋白用鎳親和層析柱純化后,達電泳純。
5.根據(jù)權利要求4所述的融合蛋白,其特征在于:對Hela細胞的增殖有一定的抑制作用。
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