[發(fā)明專利]利用銅離子特異性DNA和SYBR Green I熒光法檢測(cè)銅的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410183078.1
• 申請(qǐng)日: 2014-05-02
• 公開（公告）號(hào): CN103940797A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周培;詹深山;徐涵楚;詹學(xué)佳;張暐霖;呂晶
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64
• 代理公司: 上海交達(dá)專利事務(wù)所 31201
• 代理人: 王毓理;王錫麟

1.一種利用銅離子特異性DNA和SYBR?Green?I熒光法檢測(cè)銅的方法，其特征在于，通過含有銅離子特異性DNA的檢測(cè)液制備得到標(biāo)準(zhǔn)銅離子檢測(cè)體系，通過與空白對(duì)照液共同檢測(cè)熒光強(qiáng)度后制成濃度‐相對(duì)熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)曲線；最終在檢測(cè)時(shí)通過將待測(cè)水樣置于含有銅離子特異性DNA的檢測(cè)液中，經(jīng)檢測(cè)熒光強(qiáng)度并對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)銅離子濃度的檢測(cè)；

所述的銅離子特異性DNA，即Cu100序列為：(5'‐GATTGCACTTACTATCTCGATGAAGAAGTACCCGGAGCGACGTTGGTTGTTCTGTAAAATTGAATAAGCT?GGTATCTCCCTATAGTGAGTCGTATTACC‐3')。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，所述的標(biāo)準(zhǔn)銅離子檢測(cè)體系是指：在若干支所述檢測(cè)液中加入已知且不同濃度銅標(biāo)準(zhǔn)液后，進(jìn)一步加入DNA嵌入劑SYBR?Green?I。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，所述的空白對(duì)照液是指：在所述檢測(cè)液中僅加入DNA嵌入劑SYBR?Green?I。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，所述的檢測(cè)熒光強(qiáng)度是指：采用石英熒光用比色皿，用熒光光度計(jì)進(jìn)行掃描測(cè)定信號(hào)，并記錄標(biāo)準(zhǔn)銅離子檢測(cè)體系中的濃度銅C_Cu與其對(duì)應(yīng)的相對(duì)熒光強(qiáng)度Q＝[F₀‐F]/F₀，其中：F和F₀分別為標(biāo)準(zhǔn)銅離子檢測(cè)體系和空白對(duì)照液的熒光光譜信號(hào)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征是，所述的檢測(cè)熒光強(qiáng)度的方式具體為：以激發(fā)光狹縫為10nm，發(fā)射光狹縫為10nm，激發(fā)光波長為490nm條件下掃描，獲得其熒光信號(hào)光譜。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是，所述的不同濃度是指6～600ppb。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，所述的標(biāo)準(zhǔn)銅離子檢測(cè)體系在25℃條件下避光孵育。

8.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征是，所述的濃度‐相對(duì)熒光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)曲線為：Q＝0.307C_Cu+5.595。