[發明專利]一種蛇葡萄素的工業化提純方法

有效

• 申請號: 201410180471.5
• 申請日: 2014-04-30
• 公開（公告）號: CN103923051A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 王麒
• 申請（專利權）人: 來鳳鳳雅藤茶生物有限公司
• 主分類號: C07D311/32
• 分類號: C07D311/32;C07D311/40;C08B37/00;C07G99/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 李鵬;王敏鋒

技術領域

本發明涉及一種生物醫藥蛇葡萄素的綠色環保的工業化提純方法。僅僅采用水和食品級酒精作為提取溶劑，經過特殊的方法，得到高純度的蛇葡萄素，同時還獲得多糖復合物和多酚復合物產品。整個提取過程中沒有有毒廢水廢氣排放，綠色環保，成本低廉，適合工業化生產。

背景技術

蛇葡萄素具有保肝、解酒、降血壓、抗腫瘤、促進皮膚修復等重要藥用價值，近些年被開發成各種藥物、功能食品或化妝品。因此也導致蛇葡萄素的需求量巨大，蛇葡萄素的工業化高效提取和純化技術也受到行業內的廣泛關注。目前在天然產物的提取工藝上，采用有毒有機溶劑脫脂去雜以提取天然藥物或食品成分仍舊是廣泛使用的方法。然而，有毒有機溶劑殘留給藥品或食品生產帶來了很多安全隱患。在蛇葡萄素的提取純化技術中，目前的文獻報道和公開的專利技術可以歸結為以下基本方法：采用石油醚或者汽油等脂溶性有機溶劑對干燥物料脫脂，然后對脫脂后的物料用水加熱沸煮提取，然后對提取液進行濃縮沉淀或者柱層析，得到純度較高的蛇葡萄素。這類工藝存在一個致命的弱點：就是在脫脂過程中采用了有毒有機溶劑，使得提取的蛇葡萄素中帶有有毒溶劑殘留。因此，研究一種簡單有效、綠色環保和可以大規模低成本使用的蛇葡萄素提取方法對于該行業的健康發展至關重要。本發明具體解決以下關鍵技術問題：（1）采用純凈水和食品級酒精作為提取溶劑，除此外不采用任何其他溶劑；（2）通過特殊的溫度控制和乙醇濃度控制，將提取液中的雜質分步去除。

本發明方法整個過程不需要有毒溶劑也不需要柱層析。在醇提物沉淀時采用稀醇（醇提物加入到十倍量水中沉淀，就是稀醇）冷卻法達到脫脂的目的，同時得到沉淀，對沉淀再次加熱水溶和特定溫度冷卻，分離出多酚，然后繼續特定溫度冷卻，得到高純度的蛇葡萄素。本方法是基于總提取液中的以葉綠素為主的脂溶性成分、藤茶多酚中的各種成分以及蛇葡萄素的水溶性差異來實現分離的。因為藤茶水提液中的主要雜質有：脂肪、葉綠素、蛋白質、膠質等脂溶性成分，多糖和淀粉等水溶性成分，蛇葡萄素和各種多酚類等半水溶性成分。研究報道證明藤茶的黃酮類化合物中主要成分是蛇葡萄素，另有少量的黃酮類雜質如楊霉素、槲皮素、二輕槲皮素、芹菜素和山奈酚以及小分子的多酚類。在藤茶的水提液中，由于蛇葡萄素含有較多的羥基（6個羥基）及其3’-位的立體結構，其水溶性遠遠高于楊梅素、槲皮素、二輕槲皮素、芹菜素和山奈酚，因此我們利用這個性質差異，通過調節沉淀溫度，實現蛇葡萄素與其他黃酮類和多酚類的有效分離。

此外，采用水提工藝效率較低，主要是因為水的粘度大，浸透力弱，如何提高水的穿透力，是水提工藝的關鍵。關于提高水的穿透力關鍵在于降低水分子團的水分子數以提高水分子的滲透力，基于此，本發明采用了磁化水循環法提取，使提取罐的水溶液不斷地循環經過磁化器磁化，可以提高提取效率50%以上，提取率高出20-30%。

發明內容

????本發明的目的是在于提供了一種蛇葡萄素的工業化提純方法。在整個提純過程中，僅僅只采用純凈水和食品級酒精作為提取溶劑。采用醇提法去除多糖、淀粉等大分子水溶性雜質，采用稀醇（醇提物加入到十倍量水中沉淀，就是稀醇沉淀）沉淀法去除葉綠素等脂溶性雜質，采用控溫沉淀法去除雜質黃酮和多酚類。最終得到高純度蛇葡萄素和副產品粗多糖、總多酚。

為了實現上述的目的，本發明采用以下技術措施：

一種蛇葡萄素的工業化提純方法，其步驟是：

步驟1、純水通過表面磁場強度為2000-6000mT磁化器磁化后加入到提取罐至浸沒物料，物料即顯齒蛇葡萄的干燥葉片或者新鮮的顯齒蛇葡萄葉片；

步驟2、然后沸煮至95℃保溫0.5-1小時，在保溫的同時，物料的提取液在循環泵的驅動下通過孔徑為0.5-1毫米的濾板，進入表面磁場強度為2000-6000mT的磁化器進行磁化后由加水管口回到提取罐中，提取完畢后由管口收集提取液；

步驟3、對提取液采用人工制冷或自然冷卻將溫度冷卻到10℃以下，靜置沉淀5-8小時，抽取清液后剩余的沉淀抽盡水分至無水滴；

步驟4、然后向步驟3收集的沉淀中加入濃度不低于95%的食品級乙醇（山東濟寧市高科工業水處理化工有限公司），超聲震動（40KHz，500W，深圳潔泰PS-40）并50-60℃加熱保溫提取0.5-1小時，然后趁熱抽濾上層清液，抽取清液后所得的沉淀為多糖、蛋白質、淀粉和膠質的混合物，可以直接作為功能食品使用，其多糖含量在20-50%左右；

步驟5、對步驟4抽取的上層清液用工業旋轉蒸發器進行真空濃縮至蒸發器壁上出現白色結晶時收集濃縮液；