[發明專利]一株絲枝霉菌株及其生產β-葡萄糖苷酶的方法

有效

• 申請號: 201410179291.5
• 申請日: 2014-04-30
• 公開（公告）號: CN103937692A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發明（設計）人: 江波;張濤;周林芳;沐萬孟;繆銘
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/42;C12R1/645
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙) 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

1.一株絲枝霉菌株，其分類命名為絲枝霉（Aphanocladium?sp.）SK34.001，其保藏號為CCTCC?NO：M?2014090，保藏單位為中國典型培養物保藏中心。

2.根據權利要求1所述絲枝霉菌株，其特征在于：所述菌株的核糖體DNA?ITS序列如SEQ?ID?NO：1所示。

3.權利要求1所述絲枝霉菌株CCTCC?NO：M?2014090生產β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于步驟如下：

（1）斜面培養：取絲枝霉菌株CCTCC?NO：M?2014090進行斜面培養，采用PDA培養基，各組分以g/L計：馬鈴薯200，葡萄糖20，瓊脂15~20；自然pH，115℃下滅菌30min；培養溫度為25~35℃，培養時間3~8天；

（2）種子培養：采用牛肉膏蛋白胨培養基，各組分以g/L計：牛肉膏2~5，胰蛋白胨5~8，氯化鈉2~5，自然pH，121℃滅菌20min；250mL三角瓶裝液30~50mL，將步驟（1）所得的斜面培養液進行種子培養，搖瓶轉速150~200rpm，培養溫度25~35℃，培養時間18~24h；

（3）發酵培養：發酵培養基組分以g/L計：麩皮20~40，硫酸銨4~6，磷酸二氫鉀2~3，硫酸鎂0.3~0.5，氯化鈣0.3~0.5，自然pH，121℃滅菌20min；步驟（2）所得的種子培養液按體積百分數2%~5%接種量接種于發酵培養基中，搖瓶轉速150~200rpm，培養溫度25~35℃，培養時間3~8天；

（4）β-葡萄糖苷酶酶粉制備：將步驟（3）制得的發酵液在5000~10000rpm離心10~30min或過濾去除菌體即得發酵上清液，經超濾除去鹽和雜蛋白，再經硫酸銨沉淀、透析，最后將透析液進行冷凍干燥即得β-葡萄糖苷酶酶粉。