[發明專利]一種核轉錄因子突變體rFoxO3a-MTSS及其重組載體與應用

無效

• 申請號: 201410178820.X
• 申請日: 2014-04-29
• 公開（公告）號: CN103965345A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 齊緒峰;李昀鍵;陳卓瑩;夏景波;蔡冬青;龍穎妍;趙天琪;吳彩紅;王健歡
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/12;C12N15/85;C12N15/66;C12Q1/68
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;陳燕嫻

技術領域

本發明涉及一種轉錄因子突變體，特別涉及一種核轉錄因子突變體rFoxO3a-MTSS及其重組載體與應用。

背景技術

核轉錄因子FoxO3a可通過調節Bim、Fas ligand(FasL)、TNFR2、p27、p53、抗氧化物酶等多種下游靶基因的轉錄而發揮促細胞凋亡、細胞周期阻滯及抗氧化等不同的生物學功能。既往研究表明，FoxO3a廣泛分布于哺乳動物的多種組織和細胞中，并參與糖代謝、骨骼肌的分化發育、血管發生、抑制細胞增殖、抑制心肌肥厚等生理和病理過程。因此，研究不同病理及生理條件下FoxO3a轉錄因子的功能越來越受到人們的廣泛關注。Akt是哺乳細胞中廣譜存在的經典信號分子，可通過促進FoxO3a的磷酸化而使其失活，從而給體內研究FoxO3a基因的功能造成了巨大困難。

目前，國內外的研究重點放在了人類組織及細胞中FoxO3a的功能研究。在人體組織及細胞中，FoxO3a在體內可被其上游調控因子Akt磷酸化其Thr-32、Ser-253及Ser-315等位點而導致轉錄因子FoxO3a失活。然而，大鼠已經成為研究人類重大疾病的經典模式動物，尤其是在一些需要進行外科手術的疾病模型中，大鼠比小鼠更具有優勢，越來越受到人們的關注。然而，人源及大鼠來源的FoxO3a基因序列存在一定差異，而且其在體內被Akt激活的位點不同。因此，本發明利用基因操作技術，構建大鼠FoxO3a基因的突變體及其重組質粒，使其能夠擺脫Akt磷酸化的影響而在體內持續活化，為利用大鼠模型研究FoxO3a基因的功能及相關疾病的治療提供了強有力的手段，可廣泛應用于FoxO3a基因相關的大鼠細胞及動物模型研究，具有重要的科學意義與應用價值。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種核轉錄因子突變體rFoxO3a-MTSS。

本發明的另一目的在于提供含有編碼上述核轉錄因子突變體rFoxO3a-MTSS核苷酸序列的重組載體。

本發明的再一目的在于提供上述重組載體的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種核轉錄因子突變體rFoxO3a-MTSS，其氨基酸序列如下所示：MAEAPASPVPLSPLEVELDPEFEPQSRPRSCWPLQRPELQASPAKPSGETAADSMIPEE60DDDEDDEDSGGRGSSAMVIGGGVSSALGSGLLLEDSARLLSPGGQDLGTGPASSAGALSG120GTQTQLQPQQPLPPPQPGAAGGSGQPRKCSSRRNAWGNLSYADLITRAIESSPDKRLTLS 180QIYEWMVRCVPYFKDKGDSNSSAGWKNSIRHNLSLHSRFMRVQNEGTGKSSWWIINPDGG 240KSGKAPRRRAVMDNSNKYTKSRGRAAKKKAALQAAPESADDSPSQLSKWPGSPTSRSSD 300ELDAWTDFRSRTNNASTVSGRLSPILASTELDDVQDDDGPLSPMLYSSSASLSPSVSKP 360CTVELPRLTDMAGTMNLNDGLAENLMDDLLDNIALPPSQASPPGGLMQRSSSFPYTAKSS 420GLGSPTSSFNSTVFGPASLNSLRQSPMQTIQENRPATFSSVSHYGNQTLQDLLTSDSLSH 480SDVMMTQSDPLMSQASTAVSAQNARRNVMLRNDPMMSFAAQPTQGSLVNQNLLHHQHQTQ 540GALGGSRALSNSVSNMGLSDSSSLGSAKHQQQSPVSQSMQTLSDSLSGSSLYSASANLPV 600MGHDKFPSDLDLDMFNGSLECDMESIIRSELMDADGLDFNFDSLISTQNVVGLNVGNFTG 660AKQASSQSWVPG*672