[發(fā)明專利]一種基于酶促異構(gòu)化反應(yīng)和連續(xù)色譜分離原位耦合的D?塔格糖生產(chǎn)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410177891.8
• 申請日: 2014-04-29
• 公開（公告）號: CN103923959B
• 公開（公告）日: 2018-03-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐進;余衛(wèi)芳;周慧君
• 申請（專利權(quán)）人: 溫州大學(xué)
• 主分類號: C12P19/24
• 分類號: C12P19/24;C12P19/02;C07H3/02;C07H1/06
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務(wù)所有限公司33100
• 代理人: 劉曉春

1.一種基于酶促異構(gòu)化反應(yīng)和連續(xù)色譜分離原位耦合的D-塔格糖生產(chǎn)方法，包括以下步驟：

(1)配置pH值6～7.4的緩沖溶液；

(2)將嗜熱的L-阿拉伯糖異構(gòu)酶在部分緩沖溶液中充分溶解，作為酶溶液；

(3)將D-半乳糖在水中充分溶解，作為原料液；

(4)將步驟(1)、(2)、(3)中分別得到的緩沖溶液、酶溶液和原料液經(jīng)混合預(yù)熱后，作為進料液，所述的進料液中不含目標(biāo)產(chǎn)物D-塔格糖；

(5)將步驟(4)中得到的進料液進入模擬移動床反應(yīng)器，經(jīng)原位反應(yīng)和分離后，直接得到D-塔格糖產(chǎn)品溶液；所述模擬移動床反應(yīng)器為等溫操作，柱溫60～80℃；所述模擬移動床反應(yīng)器為四區(qū)模擬移動床反應(yīng)器，每區(qū)由1～6根色譜柱組成；所述四區(qū)模擬移動床反應(yīng)器的操作條件為：切換時間60～80min，I區(qū)流率1.35～1.4，II區(qū)流率0.4～0.8，III區(qū)流率0.6～0.93，IV區(qū)流率≤0.4。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-塔格糖生產(chǎn)方法，其特征在于：步驟(1)中所配置的緩沖溶液每升中含有氯化鈉8～8.5g、磷酸氫鈉30～50g和磷酸二氫鈉0.2～0.5g，調(diào)節(jié)pH值至6～7.4。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-塔格糖生產(chǎn)方法，其特征在于：步驟(2)中L-阿拉伯糖異構(gòu)酶為從大腸桿菌K12基因組中通過克隆方法表達阿拉伯糖異構(gòu)酶制得的粗酶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-塔格糖生產(chǎn)方法，其特征在于：步驟(4)中所配進料液中D-半乳糖濃度為10～150g/l，酶活力單位為0.1～0.28U/ml，pH值為6～7.4。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-塔格糖生產(chǎn)方法，其特征在于：步驟(4)中混合預(yù)熱過程在緩沖罐中進行。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-塔格糖生產(chǎn)方法，其特征在于：步驟(4)中混合預(yù)熱溫度為60～80℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的D-塔格糖生產(chǎn)方法，其特征在于：步驟(5)中模擬移動床反應(yīng)器中的色譜柱填料為Sugar SP0810。