[發明專利]七葉一枝花種子繁殖的兩步育苗法

有效

• 申請號: 201410176881.2
• 申請日: 2014-04-29
• 公開（公告）號: CN103931502A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發明（設計）人: 宋發軍;劉學群;王春臺;余曉東;張鵬
• 申請（專利權）人: 中南民族大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01C1/00
• 代理公司: 武漢華旭知識產權事務所 42214
• 代理人: 劉榮

技術領域

本發明涉及一種七葉一枝花種子繁殖的兩步育苗法，屬于植物種植技術領域。

背景技術

七葉一枝花(Paris?polyphylla?var.chinensis)又叫重樓、七葉蓮、蚤休等，最早在《神農本草經》記載的是以藥用部位根狀莖之名“蚤休”，是百合科(Liliaceae)重樓屬(Paris)多年生草本植物的總稱(國家藥典委員會，2010)。

七葉一枝花的株高為30～100cm，葉片5～11枚，形狀為長圓狀披針形、窄卵形，一朵黃綠色的花生長于輪生葉片的莖頂；莖單一直立生長，多呈白綠色和紫紅色，生長發育時期一般為275～376天；褐色、具有斜向環節、橫生、肥大且常彎曲的根狀莖生長于地下，直徑1.3～3cm，長3～8cm，在其頂端有凹陷的莖殘基或芽痕，且有收縮根；花期一般在5～7月份；果期在8～10月份，果實為蒴果，蒴果裂開，種子為多數的紅色肉質漿果，種子從繁殖到藥用需要5～10年，資源再生很慢。導致藥用野生七葉一枝花的資源瀕臨枯竭。因此，國內外學者開始廣泛關注七葉一枝花的引種栽培、不同外植體的組織培養和種子的快速萌發繁殖技術。

現有技術中研究七葉一枝花繁殖方式主要是有性繁殖和營養繁殖。七葉一枝花種子具有“二次休眠”的特性，使其繁殖周期長，技術的關鍵是打破種子休眠，促使種子快速萌發。目前采用較多是根莖的切塊繁殖，不僅消耗了藥用部分，而且易造成種質資源退化，抗逆性降低。研究表明，高溫和低溫都能抑制七葉一枝花種子的萌發和胚根的生長，在9℃的低溫，其發根率為0。研究七葉一枝花種子的結構發現，成熟種子的胚分化不完全，種子具有“二次休眠”的生理特性，若單獨使用高溫和低溫，則對種子休眠的解除沒有效果，只有通過高溫和低溫的交替處理，才能打破種子的休眠，促進種子的萌發和長出幼苗。

對七葉一枝花種子的研究還發現，每年9～10月采摘成熟的開裂的七葉一枝花種子，去掉紅色的外種皮后把種子置于低溫4℃保存，結果1年內，實驗時種子可以隨時取用，這就給試驗帶來很大的方便。但是，通過對新種子和舊種子萌發率的檢測試驗發現，新種子的萌發率比保存一年的舊種子高。種子在低溫條件儲存，雖然可能引起了細胞內的某些生理生化的變化或打破了胚的生理平衡，從而可以增強種子的脫分化的能力，但是種子層積的時間過久，也可能細胞內某些酶的生理結構遭到破壞，從而影響了種子的萌發率。

從上述分析中可以看出，目前七葉一枝花種子萌發繁殖技術存在下述不足：一是種子具有“二次休眠”特性，萌發繁殖時間較長；二是萌發率不高；三是不適合大規模生產，雖然有些育苗法能實現縮短育苗時間，但卻存在出苗率低的問題。因此有必要研究開發更好的促使七葉一枝花種子快速萌發繁育的技術，既能實現快速繁育，又能保證高的出苗率。

技術方案

為改進現有的七葉一枝花種子萌發技術中，種子處理操作繁瑣、萌發時間長的缺點，本發明提供了一種七葉一枝花種子繁殖的兩步育苗法，該方法采用兩步法萌發繁育七葉一枝花種苗，與現有的七葉一枝花的育苗技術相比較，實現了在保證萌發率較高的情況下大幅縮短萌發時間，一般5-6個月即可繁育出具有一片子葉的種苗，萌發率高達70～75％，而且由于本發明使用了培養基，種苗生長發育良好。

實現本發明目的所采用的技術方案是第一步對種子的進行預處理，并使其在無菌條件下萌發；第二步待萌發的種子胚根長至2.5～3cm時，剝離胚乳及種皮,然后在培養基上培養成無菌植株苗。

該方法的具體步驟如下：

第一步：預處理及萌發

(1)對種子進行預處理：將采摘的成熟的七葉一枝花種子去除穎殼，搓去紅色外種皮，剩下乳白色的種子，室溫條件下自然陰干7～14天；將種子裝入透氣袋內，進行高低溫交替變溫處理,即交替于0～4℃低溫環境放置n天，于18～22℃高溫環境放置n天，10≤n≤15，共持續60～90天；

(2)浸種：將變溫處理的種子先用ddH₂O于25～35℃浸泡24～48h，期間每隔5～6小時換水一次，再用200～400mg/L的GA₃于18～22℃浸泡48～72h，將浸種后的種子用ddH₂O沖洗3～5次；