[發明專利]與豬產仔數性狀相關的分子標記及其應用

無效

• 申請號: 201410176235.6
• 申請日: 2014-04-27
• 公開（公告）號: CN103911382A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 趙書紅;陳尚上;林瑞意;朱猛進;李新云;曹建華;李長春;余梅
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 張紅兵

技術領域

本發明涉及豬分子標記制備技術領域，具體涉及一種與豬產仔數性狀相關的分子標記及其應用，所述的分子標記從豬PTGS2基因中克隆得到，它包括豬PTGS2基因編碼區序列突變位點的檢測方法與應用。

背景技術

畜牧業的發展水平是判斷國家和地區農業發達程度的關鍵指標(李順,2010)。養豬業是畜牧業的重要組成部分，豬肉需求量在中國肉類制品中位居首位。隨著人們對繁殖性狀的日益重視，產仔數作為最重要的繁殖性狀正受到越來越多的關注和研究。Chris指出，將母豬單胎產仔數增加1頭，英國養豬業利潤將增加7億元左右。決定產仔數的關鍵因素是胚胎成活率，而影響胚胎成活率最關鍵時期為胚胎附植(著床)時期(Bazer?et?al.,2009)。PGs對于胚泡著床和蛻膜化有著很重要的作用，它能夠增強毛細血管通透性及促有絲分裂活性以保證胚胎附植的順利完成。PTGS2是合成PGs起始階段重要的限速酶，PGs在生殖過程中能否發揮生理功能取決于PTGS2的表達。與此同時，缺乏PTGS2本身也會導致卵母細胞成熟度遭到破壞，排卵、受精、蛻膜化等過程發生異常。

豬PTGS2基因定位于9號染色體，全長11.3kb。包含十個外顯子，九個內含子。mRNA全長為3596bp。PTGS包括結構型同工酶PTGS1和誘導型同工酶PTGS2。兩者在表達調控功能上均有較顯著差異。PTGS2能夠促進形成癌癥，是腫瘤生成的促進劑。另一方面，PTGS2與排卵、胚胎附植、分娩等生理過程密切相關。小鼠實驗表明，前列腺素E2(PGE2)受體亞型EP3和EP4在HOXA10(-/-)小鼠子宮基質中受到P4異常調節，而HOXA11、孕激素受體(PR)等則未受影響。EP3和EP4在子宮中的表達量與野生型小鼠差異較大。這說明在小鼠子宮中HOXA10能特異性介導P4對EP3、EP4的調節。PGs對生殖過程有很重要的作用。卵泡分泌的PGF2a能夠讓卵巢平滑肌收縮有助于排卵；PGs能夠增強毛細血管通透性及促有絲分裂活性以保證胚胎附植的順利完成；子宮產生的PGF2a能夠溶解黃體；分娩時PGF2a能夠進一步收縮子宮以利于分娩。PTGS2是合成PGs起始階段重要的限速酶，PGs生理功能的實現取決于PTGS2的表達。與此同時，缺乏PTGS2本身也會導致卵母細胞成熟度遭到破壞，排卵、受精、蛻膜化等一系列生理過程無法正常完成。PTGS2在胚泡著床及蛻膜化過程中的表達受HOXA10與P4調控。

常規選擇法改良產仔數的缺點很明顯，選擇過程花費時間較長，耗費金錢較多，準確性有待提高(Johnson?et?al.,1999；Linville?et?al.,2001)。目前，標記輔助選擇(MAS)已作為常規選擇法的輔助手段而被廣泛應用，大大提高了產仔數性狀的改良速度。標記輔助選擇(MAS)包括隨機引物擴增多態性(RAPD)標記、微衛星標記、PCR-RFLP標記、分子標記與QTL位點的連鎖分析方法等(趙西彪,2008)。其中PCR-RFLP因檢測不受發育階段、性別等外部條件的影響，所標記的變異數目不受限制，實用可靠而得到廣泛的應用。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，獲得一種與豬產仔數性狀相關的分子標記，從豬PTGS2基因的編碼區序列克隆得到本發明的分子標記，尋找突變位點以及基因多態性的檢測方法，為豬產仔數性狀檢測提供一種分子標記和檢測方法。

本發明的技術方案如下：

申請人克隆得到一種與豬產仔數性狀相關的分子標記，它包含豬(國外血緣豬大白豬和中國地方豬血緣豬陸川豬、隆林豬等)PTGS2基因1550bp的序列，其核苷酸序列如下所示：