[發(fā)明專利]一種選擇性提取酵母細(xì)胞蛋白質(zhì)的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410172051.2
• 申請(qǐng)日: 2014-04-25
• 公開（公告）號(hào): CN103951728B
• 公開（公告）日: 2017-06-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫大文;劉丹;曾新安;韓忠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華南理工大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K1/14
• 分類號(hào): C07K1/14
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司44245
• 代理人: 陳文姬

1.一種選擇性提取酵母細(xì)胞蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將酵母進(jìn)行活化，得到酵母懸浮液；

(2)對(duì)步驟(1)得到的酵母懸浮液采用脈沖電場(chǎng)處理，得到酵母提取液；所述脈沖電場(chǎng)處理，具體為：

脈沖電場(chǎng)為指數(shù)衰減波，電極距離為10～40cm，脈沖電壓為10～40kV，頻率50～200Hz，脈沖寬度為40～100μs，脈沖數(shù)為500～1000次，脈沖電處理時(shí)間為1～20s；

(3)步驟(2)得到的酵母提取液，經(jīng)離心取沉淀、水洗后得到細(xì)胞碎片；

(4)將步驟(3)所得細(xì)胞碎片制成細(xì)胞碎片懸浮液；

(5)將步驟(4)所得細(xì)胞碎片懸浮液輸送到高壓均質(zhì)機(jī)進(jìn)行高壓均質(zhì)處理，得到富含蛋白質(zhì)的提取液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇性提取酵母細(xì)胞蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，所述高壓均質(zhì)處理，具體為：

在壓力為60～80MPa下均質(zhì)3～10次。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇性提取酵母細(xì)胞蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，步驟(3)所述離心，具體為：

離心速度為4000～5000r/min，離心時(shí)間為8～10min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇性提取酵母細(xì)胞蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，所述酵母為干燥的啤酒廢酵母，蛋白含量48～50％，核酸含量6％～9％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇性提取酵母細(xì)胞蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，步驟(1)所述將酵母進(jìn)行活化，得到酵母懸浮液，具體為：

將干酵母按1:10～20的比例投放于35～38℃的溫水中復(fù)水15～20min制成酵母懸浮液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇性提取酵母細(xì)胞蛋白質(zhì)的方法，其特征在于，步驟(4)所述將步驟(3)所得細(xì)胞碎片制成細(xì)胞碎片懸浮液，具體為：

將細(xì)胞碎片按1:10～20的比例投放于25℃的蒸餾水中攪拌15～20min制成細(xì)胞碎片懸浮液。