[發(fā)明專利]一種連續(xù)檢測(cè)胰島素敏感性的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410171872.4
• 申請(qǐng)日: 2014-04-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103937870A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張星;高峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/66
• 分類號(hào): C12Q1/66;C12Q1/54;C12Q1/02;G01N33/74
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 蔡和平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于胰島素敏感性檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種連續(xù)檢測(cè)胰島素敏感性的方法。

背景技術(shù)

1)胰島素敏感性的定義及意義

胰島素是一種由胰島β細(xì)胞分泌的激素，主要作用于肝臟、脂肪和骨骼肌等組織促進(jìn)組織對(duì)葡萄糖的吸收，維持血糖的穩(wěn)定，同時(shí)參與調(diào)控碳水化合物和脂肪代謝。葡萄糖是機(jī)體最重要的代謝底物，為機(jī)體提供能量以維持生命活動(dòng)。當(dāng)胰島素對(duì)葡萄糖的作用降低時(shí)出現(xiàn)胰島素抵抗(胰島素敏感性降低)的現(xiàn)象。胰島素抵抗是包括2型糖尿病、肥胖、冠心病和高血壓在內(nèi)的很多慢性疾病的共同病理基礎(chǔ)。胰島素抵抗最顯著的結(jié)果是高血糖和代謝紊亂，而高血糖和代謝紊亂會(huì)影響全身各個(gè)組織和器官的功能。高峰等研究發(fā)現(xiàn)胰島素會(huì)激活細(xì)胞內(nèi)的PI3K-Akt-eNOS生存信號(hào)(survival?signaling)，促進(jìn)細(xì)胞的生存(Circulation2002)。胰島素信號(hào)受損是很多器官損傷的重要因素。另外，高峰等還發(fā)現(xiàn)在一些包括燒傷、外傷在內(nèi)的急性損傷中，也存在胰島素抵抗(急性胰島素抵抗)，并且胰島素敏感性和損傷程度以及預(yù)后密切相關(guān)(Crit?Care?Med2014)。最新的研究發(fā)現(xiàn)胰島素抵抗具有器官特異性。因此，檢測(cè)胰島素敏感性在生物學(xué)或醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究中常用于評(píng)價(jià)器官的損傷程度，器官功能以及代謝狀態(tài)。

2)現(xiàn)有測(cè)量方法及存在的問(wèn)題

現(xiàn)有測(cè)量離體器官或組織胰島素敏感性的方法主要有(PLoS?One2013,Am?J?Physiol?Endocrinol?Metab2008)：①觀察離體組織或者器官對(duì)放射性標(biāo)記的外源性葡萄糖的攝取水平；②觀察胰島素下游信號(hào)分子Akt、GSK3β、eNOS等分子的磷酸化水平；③觀察葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4向細(xì)胞膜上轉(zhuǎn)位的水平。

方法①中使用放射性標(biāo)記的外源性葡萄糖，由于放射性污染而受到很大的限制(J?Biol?Chem1998)。其次，該方法無(wú)法實(shí)現(xiàn)胰島素敏感性測(cè)量的量化和連續(xù)檢測(cè)。方法②和③測(cè)量的都是胰島素下游信號(hào)被激活的水平，眾所周知，這些下游信號(hào)受到很多因素的調(diào)控，因此，該方法只能間接反映胰島素的敏感性。同樣，該方法也不能實(shí)現(xiàn)胰島素敏感性測(cè)量的量化和連續(xù)檢測(cè)。發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決的問(wèn)題在于提供一種連續(xù)檢測(cè)胰島素敏感性的方法，可以實(shí)現(xiàn)離體器官或組織胰島素敏感性測(cè)量的量化和連續(xù)檢測(cè)。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：

一種連續(xù)檢測(cè)胰島素敏感性的方法，包括以下操作：

1)在離體組織或者器官處于穩(wěn)定的環(huán)境狀態(tài)下，向離體組織或者器官循環(huán)灌流含有胰島素和外源性葡萄糖的細(xì)胞外液；

2)循環(huán)灌流期間定期采集細(xì)胞外液樣本，并測(cè)量各時(shí)間點(diǎn)所采集樣本中總的葡萄糖水平、外源性葡萄糖的水平和胰島素水平，按照下式計(jì)算胰島素敏感性：

ISt=dGudt×1Im≅Gm×Ge1-Ge2Ge1Im×(t2-t1)]]>