[發(fā)明專利]一種茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的定量檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410168769.4
• 申請(qǐng)日: 2014-04-24
• 公開（公告）號(hào): CN103913528A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 董明輝;劉騰飛;顧俊榮;張麗;鄧金花;楊代鳳;陸?zhàn)┸?/a>;錢輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇太湖地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 馬明渡

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法領(lǐng)域，具體涉及一種茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的定量檢測(cè)方法，該定量檢測(cè)方法是采用改進(jìn)的QuEChERS法對(duì)茶鮮葉進(jìn)行提取、凈化，再用氣相色譜法對(duì)擬除蟲菊酯類農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)，以達(dá)到快速、簡(jiǎn)便、可靠的目的。

背景技術(shù)

茶葉是世界三大植物飲料之一，因其獨(dú)特的口感和具有抗癌、防突變、清除自由基、延緩衰老等保健功效越來(lái)越受到人們的青睞。我國(guó)是茶葉生產(chǎn)大國(guó)也是出口大國(guó)，施用農(nóng)藥是保證茶葉產(chǎn)量，控制其生長(zhǎng)過程中免受病蟲害威脅的最有效的手段，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥(英文名稱：Pyrethroid?pesticides)因廣譜、高效、成本低、用量少被廣泛應(yīng)用于茶葉病蟲害的防治工作。但是已有研究證實(shí)這類農(nóng)藥會(huì)對(duì)人體的神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生毒害作用，部分品種具有致癌、致畸、致突變作用以及一定的蓄積性，過量使用有可能在人體內(nèi)累積，造成慢性蓄積中毒。因此，關(guān)于擬除蟲菊酯類農(nóng)藥在茶葉中的殘留一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)問題。

國(guó)際上許多國(guó)家、特別是歐盟和日本制定了苛刻的農(nóng)藥殘留限量法規(guī)，以限制茶葉中農(nóng)藥的最大殘留限量(MRL)。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB2763-2012《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》規(guī)定了茶葉中25種農(nóng)藥的MRL，《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第199號(hào)》規(guī)定了21種農(nóng)藥禁止或限制在茶葉中使用。歐盟在2008年3月1日發(fā)布了新的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)(EC)No149/2008，更新了茶葉中農(nóng)藥殘留的MRL，新法規(guī)涉及茶葉農(nóng)藥殘留現(xiàn)行限量標(biāo)準(zhǔn)221項(xiàng)，臨時(shí)性限量標(biāo)準(zhǔn)171項(xiàng)，共392項(xiàng)，且90％以上的農(nóng)藥采用方法檢出限作為MRL。日本于2006年5月29日正式實(shí)施食品中農(nóng)業(yè)化學(xué)品“肯定列表制度”，該制度中與茶葉有關(guān)的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)達(dá)251項(xiàng)，且大多數(shù)農(nóng)藥的MRL要求不大于0.1mg/kg，對(duì)未設(shè)定限量標(biāo)準(zhǔn)的農(nóng)藥全部則執(zhí)行“一律標(biāo)準(zhǔn)”，即含量不得超過0.01mg/kg，且全部采用“干茶法”進(jìn)行檢測(cè)。這在很大程度上限制了我國(guó)茶葉的出口，同時(shí)對(duì)茶葉中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)也提出了更高的要求。

近年來(lái)，有關(guān)茶葉中農(nóng)藥殘留的分析方法已有不少研究報(bào)道，但主要集中在成茶上，對(duì)茶鮮葉中的殘留研究的不多。茶鮮葉作為茶葉加工的原料，是決定茶葉品質(zhì)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它的質(zhì)量好壞直接關(guān)系到茶葉品質(zhì)的優(yōu)劣。因此，直接測(cè)定茶鮮葉中的農(nóng)藥殘留量具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，不但可以實(shí)現(xiàn)茶葉農(nóng)藥的源頭控制，有效引導(dǎo)農(nóng)民正確地對(duì)茶園用藥，提高飲茶安全性，而且可以減少農(nóng)藥不合理地使用對(duì)茶園土壤環(huán)境造成污染。

由于茶鮮葉比成茶含有更多的水分、色素、水溶性灰分、茶多酚等干擾物質(zhì)，更容易造成提取凈化困難，因此現(xiàn)有的測(cè)定茶葉中菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)方法，不適用于茶鮮葉基質(zhì)的測(cè)定。國(guó)內(nèi)雖有一些關(guān)于茶鮮葉農(nóng)殘的研究工作報(bào)道，但僅涉及六六六、滴滴涕等有機(jī)氯農(nóng)藥以及少數(shù)幾種菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)，同時(shí)對(duì)茶鮮葉中高效氯氟氰菊酯、氰戊菊酯等7種菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)方法研究未見報(bào)道。而且在茶鮮葉農(nóng)藥殘留提取過程中，現(xiàn)有的報(bào)道主要運(yùn)用傳統(tǒng)的振蕩提取、均質(zhì)提取、液液萃取等方法，凈化手段針對(duì)不同的目標(biāo)農(nóng)藥多采用濃硫酸磺化法和柱層析凈化法。這些前處理方法消耗有機(jī)溶劑多、樣品通量小、應(yīng)用范圍有限、操作繁瑣、耗費(fèi)時(shí)間、成本高，對(duì)于多類多殘留不是簡(jiǎn)單或有效的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的定量檢測(cè)方法，其目的在于解決現(xiàn)有的測(cè)定茶葉中菊酯類農(nóng)藥的檢測(cè)方法耗時(shí)長(zhǎng)、操作繁瑣、消耗有機(jī)溶劑多以及檢測(cè)結(jié)果不夠穩(wěn)定可靠的問題。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的定量檢測(cè)方法，所述定量檢測(cè)方法有兩部分組成：

第一部分，用氣相色譜法分別建立已知梯度濃度的被測(cè)的擬除蟲菊酯農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線；所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立由以下步驟組成：

第一步，制備空白基質(zhì)提取液，制備方法由以下步驟組成：

(1)稱取5.0g經(jīng)測(cè)定不含被測(cè)的擬除蟲菊酯農(nóng)藥的空白茶鮮葉樣品，置于50mL離心管中，再向離心管中加入10mL含體積分?jǐn)?shù)為1％乙酸的乙腈溶液，混勻，超聲提取10～15min，再加入2g無(wú)水乙酸鈉和1g無(wú)水硫酸鎂，渦旋1.5min～2.5min，然后，以9000r/min的轉(zhuǎn)速離心3.5min～4.5min，取上清液即為待凈化的空白基質(zhì)提取液；