[發(fā)明專利]高生物量和/或高生長速度重組菌及其構(gòu)建方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410167194.4
• 申請日: 2014-04-24
• 公開（公告）號: CN105002105B
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳楠;劉偉豐;林白雪;陶勇
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院微生物研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/21;C12R1/19;C12R1/225;C12R1/46;C12R1/21
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

1.重組菌的構(gòu)建方法，包括對受體菌進行A1、A2和A3的改造或?qū)λ鍪荏w菌進行所述A1和所述A2的改造，得到生物量和/或生長速度高于所述受體菌的重組菌；

所述A1為將所述受體菌的磷酸轉(zhuǎn)移酶G亞基基因敲除；

所述A2為將所述受體菌的半乳糖抑制子基因敲除；

所述A3為向所述受體菌中導(dǎo)入葡萄糖激酶基因；

所述受體菌為大腸桿菌。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述受體菌為大腸桿菌BW25113。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述磷酸轉(zhuǎn)移酶G亞基基因編碼SEQ IDNo.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

所述半乳糖抑制子基因編碼SEQ ID No.3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

所述葡萄糖激酶基因編碼SEQ ID No.5所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述磷酸轉(zhuǎn)移酶G亞基基因為SEQ IDNo.2所示的cDNA分子或基因組DNA；

所述半乳糖抑制子基因為SEQ ID No.4所示的cDNA分子或基因組DNA；

所述葡萄糖激酶基因為SEQ ID No.6的第237-1205位所示的cDNA分子或基因組DNA。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述葡萄糖激酶基因通過葡萄糖激酶基因表達盒導(dǎo)入；所述葡萄糖激酶基因表達盒的核苷酸序列是SEQ ID No.6的第61-1554位。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述葡萄糖激酶基因通過SEQ ID No.6所示的DNA分子導(dǎo)入。

7.由權(quán)利要求1-6中任一所述方法構(gòu)建的重組菌。

8.產(chǎn)鏈孢紅素重組菌的構(gòu)建方法，包括向權(quán)利要求7所述的重組菌中導(dǎo)入鏈孢紅素合成相關(guān)基因，得到產(chǎn)鏈孢紅素重組菌。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于：所述鏈孢紅素合成相關(guān)基因由櫳牛兒櫳牛兒基焦磷酸合成酶基因、八氫番茄紅素脫氫酶基因、八氫番茄紅素合成酶基因和異戊烯焦磷酸異構(gòu)酶基因組成；所述櫳牛兒櫳牛兒基焦磷酸合成酶基因編碼由SEQ ID No.8所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；所述八氫番茄紅素脫氫酶基因編碼由SEQ ID No.9所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；所述八氫番茄紅素合成酶基因編碼由SEQ ID No.10所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；所述異戊烯焦磷酸異構(gòu)酶基因編碼由SEQ ID No.11所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。

10.由權(quán)利要求8或9所述方法構(gòu)建的產(chǎn)鏈孢紅素重組菌。