[發(fā)明專利]大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育育性恢復(fù)基因的分子標(biāo)記及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410165808.5
• 申請日: 2014-04-22
• 公開（公告）號: CN103981177A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張魯剛;許小勇;張玉
• 申請（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 西安恒泰知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 61216
• 代理人: 李鄭建

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)的植物分子標(biāo)記輔助育種領(lǐng)域，涉及與一種大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育可育基因緊密連鎖的分子標(biāo)記及應(yīng)用。

背景技術(shù)

大白菜(Brassica?campestris?L.ssp.pekinensis(Lour.)Olsson)是十字花科蕓薹屬白菜種中最重要的蔬菜作物之一，原產(chǎn)中國，是我國乃至世界性大宗蔬菜。早在上世紀(jì)90年代，陜西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所就通過種間雜交及回交技術(shù)把甘藍(lán)型油菜CMS中轉(zhuǎn)育至大白菜育成CMS7311(張魯剛，郝東方，結(jié)球白菜溫度敏感細(xì)胞質(zhì)雄性不育系CMS7311育性轉(zhuǎn)化的研究，植物學(xué)報，2001，43(11)：1123-1128)，進(jìn)一步研究確認(rèn)該CMS也含有異常的開放閱讀框ORF224，并帶有部分溫敏特性；并在大白菜找到可恢復(fù)CMS育性的恢復(fù)系，確定恢復(fù)基因為單基因遺傳。由于傳統(tǒng)的育性表型選擇要等到開花，通過田間直接觀察完成。對于攜帶恢復(fù)基因的優(yōu)良材料，要將其轉(zhuǎn)育為不育系，必須經(jīng)過雜交，自交，同時用不育系測交判斷其基因型等過程，操作起來費(fèi)時費(fèi)力，周期長，育種進(jìn)程慢。為了加快大白菜胞質(zhì)雄性不育育種速度，采用現(xiàn)代生物技術(shù)，進(jìn)行分子標(biāo)記輔助育種十分迫切。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于，提供一種大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育可育基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，其中：

(1)提供大白菜CMS7311育性恢復(fù)基因的InDel標(biāo)記和SCAR標(biāo)記各1個；

(2)提供InDel標(biāo)記和SCAR標(biāo)記的PCR引物序列；

(3)提供對大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育及其育性恢復(fù)基因進(jìn)行輔助選擇過程中對上述標(biāo)記進(jìn)行應(yīng)用的方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述任務(wù)，本發(fā)明采取如下的技術(shù)解決方案：

一種與大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育可育基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，其特征在于，所述的與大白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育可育基因緊密連鎖的分子標(biāo)記是與位于大白菜CMS7311育性恢復(fù)基因兩側(cè)并與其緊密連鎖的InDel78標(biāo)記和恢復(fù)系序列SCAR42標(biāo)記，其中，InDel78標(biāo)記由恢復(fù)系序列InDel78F和不育系序列InDel78S組成；

所述的恢復(fù)系序列InDel78F大小為1146bp，具體序列如下：

5-ATCATATCCTGTCTATTTCGTGCTTCTCCTAAAAGAGTGATCTTAAGACCCAATCATCATGAGAATGTTTCTAGCTCTCTTCCTTCTCTTGGCCTTGACCACATCTTCAAGTAAGTACCTTTCTTCTCTTCTTGGTATACGGTCCAATAACAGTATTTAAGATTTTATTTCTATGTCTTTCTTTCTCTCTAGATGCAACTTACTGCCTCTGCAAAGATGGGACAGAAGACAACGCACTTCAAGCATCAATAGACTATGTTTGTGGAAAATTAGATTGCAACCCAATCCTTGACAAGGGTGCTTGTTATCAACCAAACACCATCAAAAGCCACTGTGATTGGGCTGTTAACAGCTACTTCCAGAATGTAGCTCAAGCCCCTGGAAGCTGCGACTTCTCTGGAACTGCCACTACCAGTCAAAACCCACCTSCATGTAAGTAAAAAAGTTTACATTTTGATGCGAAAAGTTGTGGTCTTGATGAGGTTCTTTTGTGCAGATTTGGTTACCGGATGTGTCTATCCTTCAAGCGCTAGGTAACTAATGATCACTAACACAAACCTAAGCCTAACTCATTTACATGGATATGACTTATAAAAAGTTTGGTGTGTGTATTAACAGCTCTCCAGGGTCGCTTCCTTCAACTACACCACCACCGGGAACAAAGCAGACAAACGGAACCGTTACTCCAACCAACGGTGCTTCTGTTTATCAACACTAGCGCTTCTGATGTAACGTTCGTATGGAGACAAAGACATCCACATCGGTCCGTCTTTGGTTCCCTTTTGGGTAGAAAAGGAAGCTTCAGTCGTCATTGTGGTTTATATTTCTGTTGTTGCATTTATGTGAAAGTTGCTCTAATTAGAATCTTGAGTAAATAAATAAAATAAAAACAGAGCATTATGATAAAGACTTGTCAATAAAAAGATACCATATTTTTATAATTTCTAATGATCAATCATATAGACTAAAGCAAAATTTATTCACCATTTTAGTAGCTTCAACATCCAATTTAGATTATTGTTCTACAACTTCAACAACGCAACTGCCACCAGCATCATTTTGTAGTAATCTAATCTACCAGATGTTATTCAGTTAAAAAAAATATACTGTGGCAAAGAAAGAGAAACCTATGTGCCTCGTTATAAC-3；