[發(fā)明專利]檢測脂肪肉瘤的小RNA指紋圖譜及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410163935.1
• 申請日: 2014-04-22
• 公開（公告）號: CN105002177B
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 譚若穎;朱苗駿;韓武梅;陸維祺
• 申請（專利權(quán)）人: 上海翔瓊生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/11;C12N15/63;C12Q1/6886;C40B40/06
• 代理公司: 31266 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 馬莉華;崔佳佳

本發(fā)明涉及小RNA組成的指紋圖譜及其在脂肪肉瘤的診斷和治療中的應(yīng)用，由數(shù)個microRNA組成的指紋圖譜可非常有效地區(qū)分正常脂肪組織和脂肪肉瘤組織，靈敏度高，特異性強，可有效用于脂肪肉瘤的診斷、腫瘤分級和預(yù)后評價。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明公開了一種小RNA(miRNA；microRNA)指紋圖譜在脂肪肉瘤診斷中的用途，屬于生物醫(yī)學(xué)、生物工程和檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

脂肪肉瘤(LPS)是一種常見的惡性軟組織腫瘤，起源于脂肪母細胞向脂肪細胞分化的間葉細胞，故表現(xiàn)為不同分化程度的異型脂肪母細胞，均含有脂質(zhì)。根據(jù)腫瘤細胞的分化程度和類型可以分為五種亞型：分化良好型(WDLPS)、去分化型(DDLPS)、黏液樣型(MLS)、圓形細胞型(RCLS)及多形性型(PLS)，但腫瘤中通常是多型細胞混合存在。從起源來看，存在著脂肪組織的部位皆有可能發(fā)生脂肪肉瘤發(fā)生于肢體的病例占60％腹膜后間隙占15％軀干部皮下15％，原發(fā)于肝臟的脂肪肉瘤極為罕見，至今所報道的肝臟原發(fā)性脂肪肉瘤尚未超過10例。分化良好型和去分化型位于人類染色體12q，此位置還包括MDM2和CDK4在內(nèi)。

手術(shù)治療是脂肪肉瘤治療中的第一選擇。局部的廣泛切除，是減少復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的有效措施。因為脂肪肉瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移罕見，引流區(qū)淋巴結(jié)清掃多無必要。有文獻報道除粘液型和圓形細胞型脂肪肉瘤對放射治療較敏感，但是，總體來講放射治療不是治療脂肪肉瘤的主要手段，多用于腫瘤邊緣切除的病人，防止局部復(fù)發(fā)，對于局部能行根治性切除或廣泛切除的病人，術(shù)后放療意義不大。由于高分化脂肪肉瘤惡性度低，轉(zhuǎn)移的可能性小，化療意義不大。對于惡性度較高的類型為術(shù)后防止轉(zhuǎn)移，可以行化療。由于現(xiàn)在尚無對脂肪肉瘤特效的化療藥物，目前多采用聯(lián)合化療，常用的藥物有阿霉素ADM、順鉑DDP、環(huán)磷酰胺CTX、長春新堿VCR對于發(fā)現(xiàn)臨床轉(zhuǎn)移以前的微小轉(zhuǎn)移灶有治療意義。

就脂肪肉瘤的診斷方法而言，最終要靠病理學(xué)的診斷，需要與惡性纖維組織細胞瘤中的普通型和粘液型以及橫紋肌肉瘤中的多形性型鑒別開來。因此臨床上迫切需要為脂肪肉瘤開發(fā)新的生物標示物，以進行準確的診斷和/或靶向治療。

miRNA現(xiàn)已成為研究RNA的一大熱點，其表達水平和腫瘤細胞的分化程度密切相關(guān)。其在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因表達，具有廣泛的基因調(diào)節(jié)功能，可調(diào)節(jié)基因活 動各個層面，如生長、分化、凋亡等。最近，有文獻報道和LPS有關(guān)的miRNAs包括有miR-143(Ugras S等人；2011),miR-155(Zhang P等人；2012),和miR-486(Bajou K等人,2004；Borjigin N等人,2012)等。

盡管目前已有部分關(guān)于脂肪肉瘤診斷和治療的研究，在臨床上脂肪肉瘤仍然很難準確診斷并得到有效治療，患者中觀測到的死亡率表明疾病的診斷、治療和預(yù)防仍需要改進。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供有效的小RNA指紋圖譜，用于脂肪肉瘤診斷、腫瘤分級和預(yù)后評價。

本發(fā)明的第一方面，提供了一種分離的miRNA，所述的miRNA為：

(ⅰ)序列如SEQ ID NO:n所示的miRNA，其中n為選自1-21的正整數(shù)；

(ⅱ)與SEQ ID NO:n所示序列互補的miRNA；

(ⅲ)序列如SEQ ID NO:1-21所示的miRNA中的兩種或兩種以上的組合；或

(ⅳ)與SEQ ID NO:1-21所示序列互補的miRNA中的兩種或兩種以上的組合。

本發(fā)明的第二方面，提供了一種miRNA集合或組合，所述miRNA集合或組合包含序列如SEQ ID NO:1-2所示的2種miRNA。

在另一優(yōu)選例中，所述miRNA集合或組合還包含序列如SEQ ID NO:3所示的miRNA。