[發(fā)明專利]一種能共傳輸藥物和基因的納米囊泡、制造方法及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410162617.3
• 申請(qǐng)日: 2014-04-22
• 公開（公告）號(hào): CN103990134A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔣慶;王露;苑園園;曹眾;帥心濤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K47/34
• 分類號(hào): A61K47/34;A61K48/00;A61K9/51;A61P35/00
• 代理公司: 廣東世紀(jì)專利事務(wù)所 44216
• 代理人: 劉卉

1.一種能共傳輸藥物和基因的納米囊泡，其特征在于該納米囊泡為由表層的聚乙烯亞胺和中間層的聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）構(gòu)成且中間層帶有可交聯(lián)巰基的聚乙烯亞胺-b-聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）納米囊泡。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述能共傳輸藥物和基因的納米囊泡，其特征在于上述聚乙烯亞胺為支化型，其數(shù)均分子量為600?Da，上述聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）的數(shù)均分子量為1～10?KDa。

3.一種能共傳輸藥物和基因的納米囊泡的制造方法，該方法用于制造如前述任一權(quán)利要求所述的納米囊泡，其特征在于包括如下步驟：

A、用正丁胺為引發(fā)劑，引發(fā)β-天門冬氨酸芐酯N-羧酸酐聚合反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液沉淀、抽濾和洗滌后，真空干燥得到聚合物聚天冬氨酸芐酯；

B、采用馬來酸酐對(duì)聚天冬氨酸芐酯末端的氨基進(jìn)行羧基化反應(yīng)，并將反應(yīng)得到的產(chǎn)物冷凍干燥后，得到白色粉末狀的羧基化聚天冬氨酸芐酯；

C、將羧基化聚天冬氨酸芐酯經(jīng)二異丙基乙二胺和半胱胺酸混合氨解反應(yīng)后，將反應(yīng)物透析、旋干，得到羧基化聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）；

D、在催化劑的催化下，將羧基化聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）與聚乙烯亞胺進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，并將反應(yīng)液透析、濃縮和抽干后，得到聚合物聚乙烯亞胺-b-聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）；

E、將聚乙烯亞胺-b-聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）溶于有機(jī)溶劑中，并在超聲作用下將溶液滴至pH值為9的緩沖溶液中，通氧氣2?h后，在pH值為7.4的緩沖溶液中透析三天，得到含有聚乙烯亞胺-b-聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）納米囊泡的溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述納米囊泡于傳輸藥物和基因方面的應(yīng)用，其特征在于應(yīng)用方法如下：

首先將聚乙烯亞胺-b-聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）納米囊泡作為載體與親水性抗腫瘤前藥按一定的比例混合共同形成為原料，然后將原料溶于有機(jī)溶劑中配制成溶液，在超聲作用下將制得的溶液滴加至pH值為9的緩沖溶液中，然后通氧氣，再經(jīng)過透析除去未包裹的藥物及有機(jī)溶劑，最后將溶液的pH值調(diào)至7.4，即得到載藥納米囊泡；將載藥納米囊泡與質(zhì)粒DNA按照聚合物中氨基與質(zhì)粒DNA中磷酸根的一定摩爾比混合均勻后振蕩15?秒，于室溫靜置后得到載藥/基因納米囊泡。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述納米囊泡于傳輸藥物和基因方面的應(yīng)用，其特征在于上述聚乙烯亞胺-b-聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）納米囊泡與親水性抗腫瘤前藥的重量份數(shù)比為（10～1000）:1。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述納米囊泡于傳輸藥物和基因方面的應(yīng)用，其特征在于上述聚乙烯亞胺-b-聚天冬氨酸（二異丙基乙二胺/半胱胺酸）納米囊泡與親水性抗腫瘤前藥的重量份數(shù)比為（10～20）:1。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述納米囊泡于傳輸藥物和基因方面的應(yīng)用，其特征在于上述載藥納米囊泡與質(zhì)粒DNA按照聚合物中氨基與質(zhì)粒DNA中磷酸根的摩爾比為（0.1～40）:1。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述納米囊泡于傳輸藥物和基因方面的應(yīng)用，其特征在于上述載藥納米囊泡與質(zhì)粒DNA按照聚合物中氨基與質(zhì)粒DNA中磷酸根的摩爾比為（4～10）:1。

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述納米囊泡于傳輸藥物和基因方面的應(yīng)用，其特征在于上述有機(jī)溶劑體積為原料重量的5～1000倍。

10.根據(jù)權(quán)利要求4所述納米囊泡于傳輸藥物和基因方面的應(yīng)用，其特征在于上述緩沖溶液為磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液或磷酸鹽緩沖液或碳酸鹽緩沖液。