[發(fā)明專利]中藥材或中藥制劑中細(xì)胞保護(hù)生物活性測(cè)定的新方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410162543.3
• 申請(qǐng)日: 2014-04-21
• 公開（公告）號(hào): CN104034900B
• 公開（公告）日: 2017-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李振國(guó);陳艷明;張忠兵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 牡丹江友搏藥業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥制劑的新發(fā)現(xiàn)的一種生物活性或者根據(jù)該活性研制的質(zhì)量檢測(cè)方法，確切的說，本發(fā)明涉及一種含有水蛭或地龍藥材成分的中藥制劑的新發(fā)現(xiàn)的生物活性及其測(cè)定方法，該方法可用于產(chǎn)品的質(zhì)量控制或有效成分的確定。

背景技術(shù)

近年來，絲裂原激活蛋白激酶家族(mitogen?activated?protein?kinases，MAPKs)在適應(yīng)性細(xì)胞保護(hù)中的作用日益受到重視。MAPK酶屬于酪氨酸激酶系統(tǒng)，是信號(hào)從細(xì)胞外轉(zhuǎn)到細(xì)胞內(nèi)的傳遞者。它可以誘導(dǎo)某些應(yīng)激性蛋白的快速表達(dá)，如熱休克蛋白、超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶、ATP敏感性鉀通道、抗氧化因子等，而這些內(nèi)源性效應(yīng)分子表達(dá)的增加是預(yù)處理延遲保護(hù)的物質(zhì)基礎(chǔ)。

細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶(Extracellular?signal-regulated?kinases，ERKs)是MAPK家族的成員之一，分為ERK1(p44)和ERK2(p42)兩種同工型。細(xì)胞外的不同刺激如絲裂原、生長(zhǎng)因子、血管緊張素ò和氧化應(yīng)激等均可激活ERKs。活化的ERKs主要參與細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和抗凋亡作用。Guyton等(Guyton?KZ，Liu?Y，Gorospe?M，Xu?Q，Holbrook?NJ.Activation?of?mitogen-activated?protein?kinase?by?H₂0₂.Role?in?cell?survival?following?oxidantinjury.J?Biol?Chem.1996Feb23；271(8)：4138-42.)報(bào)道，ERK可對(duì)抗氧化應(yīng)激損傷，提高細(xì)胞存活率。神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素可通過激活ERK1/2而增強(qiáng)對(duì)多巴胺能神經(jīng)元的保護(hù)作用(Troadec?JD，Marien?M，Mourlevat?S，eT?a1.Activation?of?the?mitogen-activated?protein?kinase(ERK(1/2))signaling?pathway?by?cyclic?AMP?potentiates?the?neuroprotective?effect?of?the?neurotransmitter?noradrenaline?on?dopaminergic?neurons.Mol?Pharmacol.2002Nov；62(5)：1043-52.)。ERK的激活也能促進(jìn)PC12細(xì)胞的生長(zhǎng)(Hansen?Tv，Rehfeld?JF，Nielsen?FC.KCl?potentiates?forskolin-induced?PC12cell?neurite?outgrowth?via?protein?kinase?A?and?extracellular?signal-regulated?kinase?signaling?pathways.Neurosci?Lett.2003Aug14；347(1)：57-61.)。越來越多的研究表明，ERK在多種預(yù)處理引起的細(xì)胞保護(hù)中起著重要的作用。也有報(bào)道指出，ERK1/2參與了藥物或缺血預(yù)處理誘導(dǎo)的心肌延遲保護(hù)作用(Fryer?RM，Hsu?AK，Gross?GJ.ERK?and?p38MAP?kinase?activation?are?components?of?opioid-induced?delayed?cardioprotection.Basic?Res?Cardiol.2001Apr；96(2)：136-42.)。因此，ERK的細(xì)胞保護(hù)作用是多方面的。

水蛭是一味傳統(tǒng)的中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，中醫(yī)認(rèn)為它具有破血、逐瘀、通經(jīng)的作用。歷來用于治療癥瘕、痞塊、血瘀閉經(jīng)、跌打損傷。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)現(xiàn)水蛭主含蛋白質(zhì)，此外含有17種氨基酸，包括人體必需的8種氨基酸，還含有Zn、Mn、Fe、Co、Cr、Se、Mo、Ni等14種元素。具有抗凝、降低血小板聚集率、降低血脂、抗炎作用等。水蛭中的水蛭素是作用最強(qiáng)的凝血酶特異性抑制劑，它不僅能阻止纖維蛋白原的凝固，也可阻止凝血酶催化的進(jìn)一步血瘀反應(yīng)，如凝血誘導(dǎo)的血小板反應(yīng)等。由于水蛭素能有效地抑制游離的和凝血塊上的凝血酶，因此可用以防止各類血栓的形成及延伸。